[發(fā)明專利]紅松種仁多糖的檢測方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510365851.0
• 申請(qǐng)日: 2015-06-29
• 公開（公告）號(hào): CN104949933A
• 公開（公告）日: 2015-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 熊開勝;張海防;謝建庭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州東辰林達(dá)檢測技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/33
• 分類號(hào): G01N21/33
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀(jì)昌

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明屬于食物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紅松種仁多糖的檢測方法。

背景技術(shù)

在我國，食用紅松種仁的歷史己有3000多年，自唐代以來紅松種仁就成為人們喜愛的小食品，宋代更是把紅松種仁視為延年益壽的“長生果”，它既被視為美味食物，又作食療佳品，倍受醫(yī)家、營養(yǎng)家的推崇。《本草綱目》一記載：“松子味甘，性溫，無毒。主治：骨頭節(jié)風(fēng)濕，頭眩，祛風(fēng)濕，潤五臟，充饑，逐風(fēng)痹寒氣，補(bǔ)體虛，滋潤皮膚，久服輕身不老，另有潤肺功能,治燥結(jié)咳嗽”。

隨著追求天然食品浪潮的興起，紅松種仁相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)逐漸成為食品和保健品開發(fā)中的一個(gè)新亮點(diǎn)，紅松種仁中的碳水化合物總含量為2.2%。多糖是一類由醛糖或酮糖通過糖昔鍵連接而成的天然高分子多聚物，是構(gòu)成生命的分子基礎(chǔ)之一。“多糖生物學(xué)”是生命科學(xué)的新前沿，多糖的生物信息量比蛋白質(zhì)和核算還要高出一個(gè)數(shù)量級(jí)以上。

研究發(fā)現(xiàn)不同種植物所含多糖類化合物是一類免疫調(diào)節(jié)劑，它具有抑制腫瘤生長，激活免疫細(xì)胞，改善機(jī)體免疫功能等作用。對(duì)正常細(xì)胞無毒副作用。到目前為止，從植物中分離出來的多糖類化合物中以水溶性多糖最為重要。通過對(duì)免疫物質(zhì)、生物膜以及多種生物活性物質(zhì)在生物體內(nèi)活動(dòng)的研究表明，糖類在生物體內(nèi)的功能不僅僅是提供能量和參與結(jié)構(gòu)組織，同時(shí)還具有多種多樣的生物學(xué)功能，在生物生命活動(dòng)中扮演重要的角色，參與細(xì)胞的各種活動(dòng)，尤其是多糖的功能與應(yīng)用近年來更是人們關(guān)注的一個(gè)熱點(diǎn)，國內(nèi)外的大量研究證明，多糖具有多方面的生物活性與功能。

目前，對(duì)紅松種仁多糖進(jìn)行提取并優(yōu)化提取工藝以及提取產(chǎn)物的含量測定的研究還很少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種紅松種仁多糖的檢測方法，該檢測方法簡單，所需樣品量少，為進(jìn)一步研究紅松種仁多糖的藥效作用提供了一種實(shí)用有效的提取分析方法。

紅松種仁多糖的檢測方法，包括以下步驟：

步驟1，取干燥的紅松種仁，加入蒸餾水，回流提取；

步驟2，將步驟1所得提取液冷凍離心，所得離心上清納濾濃縮；

步驟3，在步驟2所得濃縮液加入正戊醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；

步驟4，在步驟3所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，棄上清；

步驟5，在步驟4所得沉淀中加入正丁醇和三氯甲烷的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；

步驟6，在步驟5所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，所得沉淀經(jīng)無水乙醇洗滌，即得紅松種仁多糖；

步驟7，將步驟6所得紅松種仁多糖用紫外分光光度計(jì)，490nm處測定吸光度值，以葡萄糖做對(duì)照，測定含量。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟1中紅松種仁的用量為20～60g，蒸餾水的用量為10～50mL。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟1中回流提取溫度為70～90℃，時(shí)間為1～3h。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟2中納濾膜孔徑為100～200nm。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟2中冷凍離心的條件為-10℃、3000～5000rpm，時(shí)間為10～15min。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟3中濃縮液的用量為5～10mL，正戊醇和乙酸乙酯的混合液的用量為25～45?mL，混合液中正戊醇和乙酸乙酯的體積比為1～5：3～9。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟4中上清和95%乙醇水溶液的體積比為2～9：7～14。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟5中沉淀用量為5～20g，正丁醇和三氯甲烷的混合液的用量為30～50mL，混合液中正丁醇和三氯甲烷的體積比為1～6：4～12。

作為上述發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟6中上清和95%乙醇水溶液的體積比為3～12：5～25。

本發(fā)明的檢測方法簡單，所需樣品量少，為進(jìn)一步研究紅松種仁多糖的藥效作用提供了一種實(shí)用有效的提取分析方法。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

紅松種仁多糖的檢測方法，包括以下步驟：

步驟1，取干燥的紅松種仁，加入蒸餾水，回流提取；

步驟2，將步驟1所得提取液冷凍離心，所得離心上清納濾濃縮；

步驟3，在步驟2所得濃縮液加入正戊醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；

步驟4，在步驟3所得上清中加入95%乙醇水溶液，離心，棄上清；

步驟5，在步驟4所得沉淀中加入正丁醇和三氯甲烷的混合液，攪拌后靜置，棄沉淀；