[發明專利]殼寡糖在制備疫苗佐劑及疫苗組合物中的用途

有效

• 申請號: 201510358631.5
• 申請日: 2015-06-25
• 公開（公告）號: CN104906574B
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 杜昱光;賈培媛;單俊杰;王玉霞;許青松;劉洪濤;程功;未金花
• 申請（專利權）人: 中國科學院過程工程研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/00;A61K9/00
• 代理公司: 北京方安思達知識產權代理有限公司 11472
• 代理人: 王宇楊;楊青

本發明公開了殼寡糖在制備疫苗佐劑及含該疫苗佐劑的疫苗組合物和疫苗制劑中的用途，所述疫苗佐劑包含殼寡糖，所述殼寡糖由以下方法制備：殼聚糖經生物酶法水解、化學法降解或物理方法裂解生成聚合度為2?20的殼寡糖；所述聚合度為2?20的殼寡糖脫乙酰度>90％，分子量范圍為400～5000Da，其中聚合度為3?10的成分比例之和不低于50％。本發明的含殼寡糖的疫苗佐劑可以用作減毒疫苗、滅活疫苗、核酸疫苗、多肽疫苗或蛋白質疫苗的佐劑。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體地，本發明涉及殼寡糖在制備疫苗佐劑及含該疫苗佐劑的疫苗組合物和疫苗制劑中的用途。

背景技術

佐劑是一類先于抗原或與抗原同時應用時能增強抗原免疫效應的物質，它的作用主要是增強機體免疫系統對抗原的特異性免疫應答反應。自200多年前英國醫生Jenner接種牛痘預防天花并取得了人體試驗成功，人類可以通過接種疫苗預防控制某些傳染性疾病。1925年法國免疫學家兼獸醫學家Gaston Ramon發現在白喉、破傷風疫苗中加入木薯淀粉、瓊脂、化膿性細菌等某些與抗原無關的物質可以特異性地增強機體對白喉和破傷風毒素的抵抗力。在此后的疫苗佐劑的研究中發現許多物質均具有佐劑效應，如木薯粉、羊毛脂、丹寧酸等。近年來，隨著人們對免疫佐劑研究的不斷深入，越來越多的物質被發現有免疫佐劑的功能，如鋁鹽佐劑、油乳佐劑、蜂膠佐劑、多糖佐劑、新型免疫佐劑等(Biomolecular Engineering,2001,18(3):69-85.)。油乳佐劑主要有油包水乳劑的弗氏佐劑(FA)、水包油乳劑的MF-59等。新型免疫佐劑有脂質體、細胞因子佐劑等。至今被我國批準合法使用的人用疫苗佐劑是鋁鹽佐劑，它可以有效地誘導免疫反應，顯著增強機體的體液免疫應答(Arch Virol，2008，153(5):831－837.)。然而，鋁佐劑只能增強機體的體液免疫功能，對于如HIV等胞內病毒無法產生有效的細胞免疫促進作用。其次，鋁佐劑主要以氫氧化鋁和磷酸鋁為代表，在注射部位產生紅腫、結節等局部反應，鋁鹽還易在體內蓄積，特別是腦部，有可能導致腦病的發生。傳統獸用疫苗中常用的佐劑有鋁鹽佐劑和油佐劑。油佐劑疫苗在抗體效價和免疫持久性方面都優于鋁鹽佐劑疫苗，但油佐劑不良反應嚴重，皮下注射會引起炎癥、潰瘍和肉芽腫；油類物質長期潴留于組織中不易代謝。

隨著免疫學研究的不斷深入和基因工程技術的迅速發展，針對不同疾病已開展了各種新型基因工程疫苗的研制，新型技術疫苗如抗原表位疫苗、基因工程疫苗等抗原純度越來越高，但這些疫苗普遍存在分子小、免疫原性弱、難以誘導機體產生有效免疫應答等不足，從而需要免疫佐劑來協同這種作用，尤其是安全無毒、能夠刺激較強細胞免疫應答的佐劑，以及適合粘膜疫苗、核酸疫苗和腫瘤疫苗的免疫佐劑。理想的疫苗佐劑應當具有以下特征：對于特定的人群或動物，要保證副作用最小；佐劑作用要持久穩定；生產成本要盡量低；增強細胞或體液免疫的強度要能達到保護要求；不同用藥途徑產生的毒副作用都應清楚研究。

殼寡糖分子量小，水溶性良好，易被人體吸收，生物活性高，具有大分子糖所不具備的更獨特的生理生化活性，同時具有純天然、無輻射、無污染等特點，在保健品、營養劑、食品添加劑等食品工業方面，植物生長調節劑及飼料添加劑等農牧業方面，廢水處理、紡織、化工、日用化學品、生物工程和醫藥等方面具有良好的應用價值，更為值得關注的是它能夠有效激活機體細胞免疫和體液免疫，將其開發為疫苗佐劑具有良好的應用前景。

殼寡糖的制備主要有化學法、物理降解法、酶法、糖基轉移法(中國生化藥物雜志，1999，20(2)：99)。化學法一般用濃鹽酸水解，但其產品多在四糖以下，而且化學反應條件十分苛刻，不易控制，后處理也繁瑣。糖基轉移法是利用低聚合度寡糖，在酶(主要是溶菌酶或幾丁質酶)的參與后，延長糖鏈成為高聚合度的寡糖，此方法主要得到六糖和七糖。酶降解法所用的酶有殼聚糖酶、纖維素酶、糖苷酶和脂肪酶等，對其聚合度無法控制。而不同聚合度的殼寡糖對其佐劑活性有影響。目前所能制備得到的非常有限的寡糖價格昂貴，其在應用上受到很大的限制。

發明內容

本發明的目的在于，提供殼寡糖在制備疫苗佐劑及含該疫苗佐劑的疫苗組合物和疫苗制劑中的用途。