[發明專利]共遞送納米載體及其制備方法

有效

• 申請號: 201510346587.6
• 申請日: 2015-06-19
• 公開（公告）號: CN104906075B
• 公開（公告）日: 2017-07-11
• 發明（設計）人: 姜虎林;喬建斌;邢磊
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/34;A61K48/00;A61P35/00;C08G81/00
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司32224
• 代理人: 劉艷艷,董建林

技術領域

本發明涉及一種共遞送藥物和基因的納米載體，具體涉及一種同時荷載基因和治療藥物的靶向遞藥系統，本發明遞藥系統能夠靶向靶細胞，并遞送基因和藥物到達胞內作用位點，達到協同治療的目的，屬于藥物制劑技術領域。

背景技術

將藥物與基因通過高分子納米載體共同包載，共同遞送到靶細胞，一方面緩慢釋放藥物，另一方面表達治療基因，達到互相促進的作用，可實現藥物治療與基因治療的協同作用，從而增加療效，是治療腫瘤等惡性疾病理想方法。

小分子多胺是基因傳遞的優良載體，但是其分子量小，壓縮核酸的能力有限，因此有必要將其合成聚合物。精胺(spermine,SPE)是多胺小分子的典型代表。它存在于所有的真核細胞內，在細胞內代謝中發揮一定的作用，是很好的生物相容性的材料。而且SPE具有四個胺基，分別是兩個仲胺和兩個伯胺。這些胺基可以與丙烯酸酯基通過邁克爾加成反應生成具有高緩沖能力的聚精胺(polyspermine，pSPE)。另外，聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)，是可生物降解的一類聚合物，具有良好的生物相容性，作為藥用輔料已獲得美國FDA批準。通過對該聚合物末端的羧基進行改性，嫁接聚精胺，制備成兩親性聚合物pSPE-PLGA，其中pSPE含有大量的仲氨基，荷正電，能很好的載帶負電荷的基因，內核PLGA作為疏水性材料能很好的裝載難溶性藥物，且具有緩釋、粒徑大小可控等優點。聚精胺pSPE在體內亦可生物降解，該代謝產物是體內大量存在的內源性物質。因此，pSPE-PLGA具有很好的生物相容性，是一種無毒、可實現基因和藥物共傳遞的理想載體。在pSPE-PLGA嫁接帶靶頭的PEG，在隱形材料PEG和靶頭共同作用下可以實現更好的靶向藥物傳遞。

發明內容

目的：本發明提供一種共遞送藥物和基因的納米載體，該遞藥系統是可用于協同治療惡性腫瘤或其他惡性疾病如肝纖維化、肝硬化等的治療藥物和基因共遞送納米給藥系統，涉及一種自組裝形成共載藥物和基因的納米共遞送系統，本發明的自組裝納米遞送系統能夠將藥物和基因同時遞送到靶細胞內，在靶細胞胞質釋放基因及藥物。

技術方案：為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：

一種共遞送納米載體，由載治療藥物的聚合物載體PLGA-pSPE-PEG-Ligand自組裝而成的納米粒與治療基因形成復合物，形成共遞送藥物與基因納米載體；

PLGA-pSPE-PEG-Ligand為一種非病毒兩親性的陽離子聚合物，由兩親性PLGA-pSPE與一端羧基一端靶頭的聚乙二醇PEG(HOOC-PEG-Ligand)三段組成的聚陽離子載體，聚合物載體PLGA-pSPE-PEG-Ligand的化學結構式如下：

其中，PLGA分子量為2-100k；pSPE分子量為2-100k；PEG分子量為1-10k；Ligand為靶頭，選自甘露糖-6-磷酸(M6P)、半乳糖(Gal)、維生素A(V_A)、葉酸(FA)、透明質酸(HA)。

Ligand為靶頭，聚乙二醇PEG，pSPE為polyspermine聚精胺，聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)。

所述的共遞送納米載體，制備方法包括以下步驟：應用反相溶劑法，將治療藥物與PLGA-pSPE-PEG-Ligand共溶于溶劑中，逐滴滴加到一定體積去離子水中，用截留分子量500-14000的透析帶在4℃下透析2d除去溶劑，得包封治療藥物的聚合物載體PLGA-pSPE-PEG-Ligand自組裝而成的納米粒；然后將治療基因溶液在渦旋下加入到等體積的載有治療藥物的PLGA-pSPE-PEG-Ligand納米膠體溶液中，渦旋30s，室溫靜置30min，即得。可適用于靜脈注射給藥、皮下給藥、粘膜給藥等。

所述溶劑為有機溶劑，選自無水DMSO(二甲基亞砜)、甲醇、乙醇中的一種或幾種；和/或，所述治療藥物為阿霉素、紫杉醇、喜樹堿、水飛薊賓。

所述治療基因為DNA或siRNA；其中，DNA為p53、HGF、Akt、PDCD；siRNA為siBcl-2、siAkt、siTGF-β1、siHSP47、siTIMP-1。