[發(fā)明專利]一種可預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510345304.6
• 申請日: 2015-06-19
• 公開（公告）號: CN104988063B
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國民;劉慧萍;劉平安;王燦;李玲;李迎秋;鮑婷婷;曾柳庭;李啟正;林政樺
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/22;C12M1/12
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿。

背景技術(shù)

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷更新和改進(jìn)，以及細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)等學(xué)科的不斷研究，人們對科學(xué)的探索從宏觀世界延伸到微觀世界。隨著光學(xué)顯微鏡以及電子顯微鏡的問世，人們嘗試從細(xì)胞水平以及細(xì)胞分子水平來探索未知的世界。但是細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染成為一個(gè)不可避免的難題，隨著科研技術(shù)的不斷改進(jìn)，人們通過一系列的手段來降低細(xì)胞被污染的概率，即便這樣，細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染問題仍然未被有效解決，這就大大延長了實(shí)驗(yàn)周期。尤其是在培養(yǎng)比較珍貴的細(xì)胞時(shí)，可能一次小小的失誤使得實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延遲以及大量實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)的消耗。

細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中需要不斷更新培養(yǎng)液，使用傳統(tǒng)的培養(yǎng)皿對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的過程中，需將舊的培養(yǎng)液吸出，添加新的培養(yǎng)液，在操作的過程中，培養(yǎng)皿蓋與培養(yǎng)皿是分開的，很容易導(dǎo)致細(xì)菌的污染，且污染后的細(xì)胞與細(xì)菌是混在一起的，難以用簡單的方法除去細(xì)菌，針對比較珍貴的細(xì)胞，為減少污染帶來的實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)的浪費(fèi)，通常在細(xì)胞污染后在培養(yǎng)液中添加大量的抗體及其它試劑對其進(jìn)行補(bǔ)救，但效果不穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容

(一)要解決的技術(shù)問題

針對現(xiàn)有技術(shù)在細(xì)胞換液的過程中容易引起細(xì)胞的污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長和實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)的浪費(fèi)的缺陷，本發(fā)明提供一種可預(yù)防細(xì)胞污染的細(xì)胞培養(yǎng)皿。

(二)技術(shù)方案

本發(fā)明所述的細(xì)胞培養(yǎng)皿，包括細(xì)胞承載皿、蓋于所述細(xì)胞承載皿上的防菌換液蓋和與所述防菌換液蓋密封連接的壓力組件。

本發(fā)明中，所述防菌換液蓋的上表面有換液凹槽，所述換液凹槽的底面為阻菌網(wǎng)。設(shè)置換液凹槽可直接通過液凹槽進(jìn)行更換培養(yǎng)液，不需直接打開培養(yǎng)皿蓋，這就減少了細(xì)胞被污染的機(jī)率。

本發(fā)明中，所述防菌換液蓋的上表面的換液凹槽優(yōu)選為向內(nèi)凹陷的小圓柱體，所述小圓柱體的底面為阻菌網(wǎng)，所述小圓柱體的高與所述細(xì)胞承載皿的高之比為3～5：6，所述小圓柱體的直徑與所述防菌換液蓋的直徑之比為1：2～4。

本發(fā)明中，所述阻菌網(wǎng)為孔徑大小為0.1μm～1μm的濾膜。絕大部分真菌的直徑大于2～30μm，本發(fā)明可以過濾掉絕大部分真菌，當(dāng)濾膜孔徑為0.22μm時(shí)，可以達(dá)到GMP或者藥典規(guī)定的除菌99.99％的要求，此時(shí)細(xì)菌也可去除，而且孔徑在0.22μm～1μm之間時(shí)，隨孔徑的減小，阻菌的效果也越好。當(dāng)孔徑為0.1μm時(shí)，基本上所有的細(xì)菌，真菌都能阻隔，且有阻隔支原體(直徑0.1μm)的作用。雖然支原體直徑也為0.1μm，但是當(dāng)粒子的直徑小于0.5μm時(shí)，其慣性顯著減小，粒子震動(dòng)會增加，所以雖然濾膜孔徑為0.1μm，也可有效阻隔直徑為0.1μm的支原體。

本發(fā)明中，所述阻菌網(wǎng)的材料優(yōu)選為聚碳酸酯膜，聚碳酸酯為一種物理性能穩(wěn)定的膜，可經(jīng)受清洗劑、加熱和大劑量輻射消毒，且不發(fā)生變黃和物理性能下降。

本發(fā)明中，所述換液凹槽的上邊緣有向下凹陷的內(nèi)沿，用于支撐所述壓力組件，所述內(nèi)沿上設(shè)有4～8個(gè)向里凹陷的卡槽。所述內(nèi)沿和卡槽主要是用于支撐和密封所述壓力組件。

本發(fā)明中，所述壓力組件為活塞式壓力組件，包括活塞筒、位于所述活塞筒內(nèi)的活塞和所述活塞上的壓力桿。

本發(fā)明中，所述活塞筒底部設(shè)有向里突出的密封槽，所述密封槽的寬度與所述換液凹槽內(nèi)沿的寬度相同，所述密封槽內(nèi)設(shè)有密封組件，所述密封槽下部設(shè)置4～8個(gè)卡齒，所述卡齒恰好與所述卡槽相吻合。卡槽與卡齒相吻合，二者對齊之后，通過轉(zhuǎn)動(dòng)活塞筒，卡齒卡于所述內(nèi)沿上，給密封圈形成壓力，提供密封的培養(yǎng)環(huán)境，可預(yù)防細(xì)菌污染。

本發(fā)明中，所述卡齒優(yōu)選為楔形。選用楔形的卡齒，隨卡齒的旋轉(zhuǎn)，卡槽與卡齒之間的壓力越來越大，可增強(qiáng)壓力組件的密封性能。

本發(fā)明中，所述細(xì)胞承載皿為頂端開口的空心圓柱體，在所述空心圓柱體的側(cè)壁的上端有4～8個(gè)通氣柱，用于支撐位于所述細(xì)胞承載皿上方的防菌換液蓋。設(shè)置通氣柱既可對防菌換液蓋起到一定的支撐作用，還有利于細(xì)胞培養(yǎng)皿的通氣。

本發(fā)明中，所述細(xì)胞承載皿的側(cè)壁的厚度為底面厚度的3～6倍。當(dāng)壓力組件工作時(shí)，氣體流過側(cè)壁上緣與防菌換液蓋之間，由于側(cè)壁較厚，氣路較長，細(xì)菌進(jìn)入培養(yǎng)皿時(shí)經(jīng)過的路徑也較長，細(xì)菌不易進(jìn)入培養(yǎng)皿，且長的氣路不易形成湍流，也可以減少細(xì)菌進(jìn)入培養(yǎng)皿。

本發(fā)明中，所述通氣柱為直徑3～6mm，高1～3mm的圓柱體，所述圓柱體的頂部為圓滑的弧狀。將通氣柱的頂部設(shè)為圓滑的弧狀，可以防止其在轉(zhuǎn)動(dòng)的過程中在所述防菌換液蓋劃出痕跡。