[發(fā)明專利]牧草根際溶磷促生菌的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510343215.8
• 申請日: 2015-06-19
• 公開（公告）號: CN104974954A
• 公開（公告）日: 2015-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王普昶;舒健虹;莫本田;張文
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省草業(yè)研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/04;A01G7/06;C12R1/01
• 代理公司: 貴陽中新專利商標(biāo)事務(wù)所 52100
• 代理人: 李余江;程新敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物肥料領(lǐng)域，特別是涉及一種牧草根際溶磷促生菌的應(yīng)用。

背景技術(shù)

本技術(shù)旨在從貴州境內(nèi)主栽牧草（黔南扁穗雀麥）根際，篩選促生溶磷菌株，測定菌株溶磷、分泌植物生長素等促生特性；研究菌株生理生化、生態(tài)適應(yīng)性、定殖能力等，獲得優(yōu)良菌株；評定應(yīng)用效果。解決我國西南地區(qū)（特別是貴州）貧瘠土地的肥料供給，降低環(huán)境污染，保護生態(tài)，促進農(nóng)牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展。而土壤中氮、磷元素缺乏已成為世界許多國家面臨的共同問題。就我國而言，調(diào)查結(jié)果顯示，74%的耕地缺磷，而且農(nóng)田土壤中磷是以磷酸鹽的化合狀態(tài)存在的，化合態(tài)中的磷由于與土壤中的Fe³⁺、Ca²⁺和Al³⁺等結(jié)合而呈水不溶性，很難被植物吸收，所以農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中每年必須向土壤施入大量的可溶性磷肥。對于所施入的磷肥，當(dāng)季作物的利用率一般只有5%～10%，加上作物的后效，也不超過25%，施入土壤的大部分磷肥實際上是以無效態(tài)累積于土壤中的。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中，為了維持和提高作物產(chǎn)量，化肥一直被認(rèn)為是解決土壤氮素和磷素缺乏問題的主要甚至是唯一途徑。特別在我國，化肥的年產(chǎn)量、總產(chǎn)量和單位面積使用量均居世界第一。但化肥生產(chǎn)成本高，隨著施用量的增加，還伴隨出現(xiàn)了肥效下降、利用率降低等現(xiàn)象，而且隨著土壤和植物中NO^2-?等離子的累積，不可避免的出現(xiàn)了污染環(huán)境、危及人畜及食品安全等生態(tài)問題。與此同時，生產(chǎn)化肥對非再生能源消耗較大，施用化肥又會導(dǎo)致土壤團粒結(jié)構(gòu)及微生物多樣性受到破壞等負(fù)面效應(yīng)。因此，探尋其它肥料來源特別是生物肥料以部分替代化肥的作用已是目前生產(chǎn)中亟待解決的問題。

黔南扁穗雀麥（Bromus?carticus?cv.Qiannan）是一種國家級優(yōu)質(zhì)牧草新品種，該品種具再生性和分蘗能力強、產(chǎn)草量高、草層密度大、葉量豐富，品質(zhì)好，抗逆性強，適宜在林、果樹下用于建植林間草地，冬季青綠，是解決南方冬春季缺乏青綠草的理想牧草之一。作為南方重要的禾草，屬嗜氮、磷植物。磷在植物的結(jié)構(gòu)和生理上起著重要作用，同時又以多種方式參與植物體內(nèi)的各種生理代謝過程，對促進植物的生長發(fā)育和新陳代謝，以及作物的早熟、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)都起著重要的作用，此外，還能提高植物的抗旱、抗寒、抗病、抗倒伏和耐酸堿的能力，磷素不足是限制植物生長和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要因素。傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量施用化肥會導(dǎo)致環(huán)境污染。肥料中的速效磷很容易與土壤中的鐵、鋁生成難溶的化合物，使土壤板結(jié)，而且磷在土壤中的運動速度很慢，植物體難以吸收利用，土壤缺磷狀況仍得不到根本緩解。因此最有效最環(huán)保的方法是篩選土壤根際中促生菌種為植株提供磷源。

溶磷微生物能夠依靠自身的代謝產(chǎn)物或其他生物協(xié)同溶解土壤中的難溶無機磷，以提高土壤中磷的利用率，具有減少化學(xué)肥料施用量，降低農(nóng)業(yè)投入成本，對環(huán)境進行微生物修復(fù)等功能。因此，如將這類溶磷微生物制作成生物菌肥，有利于提高禾本科牧草營養(yǎng)供給和生產(chǎn)性能，緩和牧草高產(chǎn)與磷需求高的矛盾，充分利用養(yǎng)分資源、降低生產(chǎn)成本，促進農(nóng)業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展,推動地方牧草品種產(chǎn)業(yè)化和生態(tài)畜牧業(yè)發(fā)展具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于從黔南扁穗雀麥根際篩選促生溶磷菌株，獲得優(yōu)良菌株并將其應(yīng)用于生物菌肥領(lǐng)域，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。

本發(fā)明是一種牧草根際溶磷促生菌的應(yīng)用，該牧草根際溶磷促生菌為扁穗雀麥根際溶磷菌Br7菌株；它的應(yīng)用包括Br7菌株在制備用于提高禾本科牧草營養(yǎng)供給和生產(chǎn)性能的生物菌肥上的應(yīng)用；具體包括Br7菌株的篩選方法、Br7菌株的環(huán)境適應(yīng)性評價方法和Br7菌株對扁穗雀麥的促生效應(yīng)評價方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的：

1、Br7菌株的篩選：

樣品采集：以5點法采集扁穗雀麥根際土壤約100克，低溫保存并在48小時內(nèi)帶回實驗室進行溶磷菌分離。

菌株分離及初篩：選用PKO無機培養(yǎng)基（含磷酸鈣）分離菌株，保存用LB培養(yǎng)基（配方見下邊）。將分離具有溶磷圈的菌株分別點接種于PKO上，每培養(yǎng)皿四個點，28?℃恒溫培養(yǎng)3?d、6?d、9?d和12?d，測量溶磷圈直徑（D）和菌落直徑（d），計算D/d值，挑選D/d值相對較大的菌株純化后保存（4?℃）備用。