[發(fā)明專利]輔助鑒定大豆結莢習性的方法及其專用引物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510342284.7
• 申請日: 2015-06-18
• 公開（公告）號: CN104894123A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發(fā)明（設計）人: 邱麗娟;關榮霞;劉桂鳳
• 申請（專利權）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，尤其涉及輔助鑒定大豆結莢習性的方法及其專用引物。

背景技術

大豆(Glycine?max(L.)Merr.)莖生長習性也稱為莖端類型、結莢習性，指大豆開花和結莢的方式，是大豆的一種重要的形態(tài)、生態(tài)習性，同時也是研究大豆的起源、進化等基礎理論的好性狀。大豆的結莢習性通常被性劃分為有限、亞有限和無限結莢習性三種類型，結莢習性與大豆的株高、開花期、節(jié)位數(shù)目、生育期、水分的利用效率及產(chǎn)量等重要性狀密切相關，如在高水肥栽培條件下大豆亞有限結莢習性品種比有限結莢習性品種更容易發(fā)揮其產(chǎn)量潛力。同時不同結莢習性的大豆干物質(zhì)積累、產(chǎn)量形成的時期存在差異，在高產(chǎn)栽培中調(diào)控處理的時間也不同。所以，準確鑒定大豆的結莢習性對選擇適于特定生態(tài)區(qū)的高產(chǎn)品種非常重要。然而，環(huán)境條件的變化對大豆的有限結結莢習性和無限結莢習性準確鑒定有很大影響。前人通過觀察開花期主要莖頂端出生花序或復葉的不同、根據(jù)植株的頂葉與最大葉的中間小葉的“長+寬”的比值分級、干物質(zhì)積累量或有無頂花序和上部節(jié)數(shù)相對值作來劃分結莢習性，但以上鑒別大豆結莢習性的方法無論是直接觀察大豆結莢習性規(guī)律的，還是間接觀察，環(huán)境條件和觀測者的經(jīng)驗等因素都會對觀測結果有較大影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術問題是如何輔助鑒定大豆結莢習性或輔助篩選具有不同結莢習性的大豆。

為解決上述技術問題，本發(fā)明首先提供了一種成套引物。

本發(fā)明所提供的成套引物，由引物對TFL1ab、引物對tfl1ta和引物對tfl1b組成；所述引物對TFL1ab由引物TFL1ab-F和引物TFL1ab-R組成；所述引物對tfl1ta由引物tfl1ta-F和引物tfl1ta-R組成；所述引物對tfl1b由引物tfl1b-F和引物tfl1b-R的組成；

所述引物TFL1ab-F是如下a1)或a2)中的任一種單鏈DNA：

a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA；

a2)與a1)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

所述引物TFL1ab-R是如下a1)或a2)中的任一種單鏈DNA：

a3)序列表的序列2所示的單鏈DNA；

a4)與a3)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

所述引物tfl1ta-F是如下a5)或a6)中的任一種單鏈DNA：

a5)序列表的序列3所示的單鏈DNA；

a6)與a5)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

所述引物tfl1ta-R是如下a7)或a8)中的任一種單鏈DNA：

a7)序列表的序列4所示的單鏈DNA；

a8)與a7)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

所述引物tfl1b-F是如下a9)或a10)中的任一種單鏈DNA：

a9)序列表的序列5所示的單鏈DNA；

a10)與a9)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

所述引物tfl1b-R是如下a11)或a12)中的任一種單鏈DNA：

a11)序列表的序列6所示的單鏈DNA；

a12)與a11)限定的單鏈DNA片段具有85％以上的同一性的單鏈DNA片段。

本發(fā)明還提供了一種試劑盒，所述試劑盒可包括上述成套引物；所述試劑盒的用途為如下(a)或(b)：(a)輔助鑒定大豆結莢習性；(b)輔助篩選具有不同結莢習性的大豆。

所述試劑盒中還可包括限制性內(nèi)切酶AvaII、HindIII、HpyCH4III和AccI。

所述試劑盒中，每個引物對可單獨包裝。

所述試劑盒中，每條引物單獨包裝。

上述任一所述成套引物或上述任一所述試劑盒在輔助鑒定大豆結莢習性中的應用。

上述任一所述成套引物或上述任一所述試劑盒在輔助篩選具有不同結莢習性的大豆中的應用。

本發(fā)明還提供了一種輔助鑒定大豆結莢習性的方法。

所述輔助鑒定大豆結莢習性的方法包括如下步驟A1)-A3)：