[發明專利]一種ST細胞培養基

在審

• 申請號: 201510341263.3
• 申請日: 2015-06-18
• 公開（公告）號: CN105087460A
• 公開（公告）日: 2015-11-25
• 發明（設計）人: 溫韜;陳杰;賈人初
• 申請（專利權）人: 上海源培生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及培養基。

背景技術

ST細胞系豬睪丸(swinetestis)細胞，體外培養呈貼壁生長，培養過程中增殖較為緩慢，且細胞消化傳代中容易成團。ST細胞對多種病毒比較敏感，如豬瘟病毒(CSFV)、豬細小病毒(PPV)、偽狂犬病毒等。目前ST細胞通過動物血清培養，動物個體不同，血清產地、批號不同，每批質量差異甚大，其成分不能保持一致，容易產生細菌和病毒，不利于細胞的培養，雖然使用動物血清成本較低但是不容易培養出較純的細胞不利于長期發展。

發明內容

本發明的目的在于提供一種ST細胞培養基，以解決上述技術問題。

本發明所解決的技術問題可以采用以下技術方案來實現：

一種ST細胞培養基，其特征在于，以終濃度計，配方如下：L-精氨酸鹽酸鹽1mg/L-1000mg/L、2-巰基乙醇0.1mg/L-200mg/L、內消旋肌醇0.01mg/L-10mg/L、一乙醇胺鹽酸鹽1mg/L-1000mg/L、植物水解物50mg/L-5000mg/L、4-羥乙基哌嗪乙磺酸1000mg/L-4000mg/L、氯化鈉1000mg/L-7000mg/L和甘氨酸1mg/L-100mg/L。

本發明減少ST細胞培養過程中產生的病毒，增大存活率加快增殖速度。2-巰基乙醇在培養基中充當抗氧化劑，4-羥乙基哌嗪乙磺酸和甘氨酸作為一種緩沖劑調節培養基中的PH值，氯化鈉能維持培養基內滲透壓的穩定。

所述配方還包括：L-精氨酸鹽酸鹽1mg/L-100mg/L、2-巰基乙醇0.1mg/L-100mg/L、內消旋肌醇0.01mg/L-1mg/L、一乙醇胺鹽酸鹽100mg/L-1000mg/L、植物水解物2000mg/L-5000mg/L、4-羥乙基哌嗪乙磺酸3000mg/L-4000mg/L、氯化鈉6000mg/L-7000mg/L、甘氨酸10mg/L-20mg/L硫酸鎂1mg/L-1000mg/L、氯化鉀50mg/L-5000mg/L、磷酸鈉1mg/L-1000mg/L、L-半胱氨酸鹽酸鹽1mg/L-1000mg/L和胸苷0.3mg/L-0.4mg/L。

本發明通過優化了部分數據使培養基成分更加精確，硫酸鎂能促進培養基中糖和蛋白質的代謝加快細胞增殖速度，氯化鉀能調節培養基中的電解質平衡，L-半胱氨酸鹽酸鹽在培養基中起到還原劑的作用，胸苷在培養基中充當藥物中間體。

所述配方還包括：L-谷氨酰胺50mg/L-5000mg/L、L-組氨酸鹽酸鹽1mg/L-1000mg/L、L-異亮氨酸1mg/L-1000mg/L、L-亮氨酸1mg/L-1000mg/L、L-賴氨酸鹽酸鹽1mg/L-1000mg/L、L-蛋氨酸1mg/L-1000mg/L和維生素B12的含量為0.6mg/L-0.7mg/L。維生素B12起到促進細胞再生的作用，L-谷氨酰胺能提高培養基的抗氧化能力，L-亮氨酸能促進培養基中糖類的代謝，L-賴氨酸鹽酸鹽促進培養基中蛋白質的代謝。

所述配方還包括：L-苯丙氨酸1mg/L-1000mg/L、L-蘇氨酸1mg/L-1000mg/L、L-色氨酸1mg/L-1000mg/L、L-酪氨酸二鈉鹽1mg/L-1000mg/L、L-纈氨酸1mg/L-1000mg/L和D-泛酸鈣0.01mg/L-10mg/L。L-蘇氨酸能促進細胞生長、提高免疫機能減少被病毒感染的幾率，L-色氨酸在培養基中起到抗氧化劑的作用，D-泛酸鈣幫助細胞形成，控制脂肪代謝。

所述配方還包括：氯化膽堿0.01mg/L-10mg/L、葉酸0.01mg/L-10mg/L、煙酰胺0.01mg/L-10mg/L、鹽酸吡哆醛0.01mg/L-10mg/L、核黃素0.01mg/L-10mg/L、鹽酸硫胺0.01mg/L-10mg/L和D-(+)-葡萄糖50mg/L-5000mg/L。氯化膽堿能增加培養基內細胞的數量，葉酸和核黃素能促進細胞的分裂和再生，煙酰胺促進生物氧化過程和組織新陳代謝，鹽酸硫胺參與糖類的中間代謝。