[發(fā)明專利]netrin?1蛋白在制備用于腫瘤治療的藥物中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510341113.2
• 申請(qǐng)日: 2015-06-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105031611B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-02-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂湘;劉德培;安曦洲;趙治國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號(hào): A61K38/17
• 分類號(hào): A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00;G01N33/68;G01N21/31
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11314
• 代理人: 程偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蛋白在腫瘤診斷和治療中的應(yīng)用，特別涉及netrin-1蛋白在制備用于腫瘤治療的藥物中的用途。

背景技術(shù)

胰導(dǎo)管腺癌(Pancreatic Ductal Adenocarcinoma，PDAC)是最致命的腫瘤之一，在所有的胰腺腫瘤中，胰導(dǎo)管腺癌占到了95％以上的比例。胰導(dǎo)管腺癌病例在發(fā)現(xiàn)時(shí)多數(shù)就已經(jīng)是晚期腫瘤或者已經(jīng)發(fā)生了遠(yuǎn)程轉(zhuǎn)移，僅有不足20％的患者能夠獲得手術(shù)治療的機(jī)會(huì)，總體的中位生存期不足1年。目前對(duì)于胰腺癌的發(fā)病機(jī)制了解甚少，這也限制了針對(duì)性的治療方案和藥物的開(kāi)發(fā)。近年來(lái)，對(duì)于胰腺癌的分子水平的表達(dá)變化以及基因突變，基因組上SNP的大規(guī)模分析方興未艾，隨著多種腫瘤模式生物，異體移植模型的應(yīng)用，對(duì)于胰腺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)分子機(jī)制的研究也有了長(zhǎng)足的進(jìn)步。多種胰導(dǎo)管腺癌相關(guān)的基因突變，如KRAS，p53，CDKN2A，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體(TGFβ)在患者病理組織內(nèi)被檢出，這提示了相應(yīng)分子對(duì)于胰腺導(dǎo)管腺腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵性。基因表達(dá)譜的分析則提供了更加廣泛跟胰腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程息息相關(guān)分子的表達(dá)變化情況。病理組織的表達(dá)芯片分析揭示了多達(dá)數(shù)百個(gè)存在明顯的表達(dá)變化的基因，包括MAPK、hedgehog、Notch在內(nèi)的多個(gè)信號(hào)通路也被觀察到了表達(dá)和磷酸化水平的變化。這些變化向我們展示了胰導(dǎo)管腺癌發(fā)生發(fā)展中潛在的調(diào)控過(guò)程，并給新的藥物靶標(biāo)和治療途徑的探索提供了參考。

最新的研究提示了軸突引導(dǎo)通路與胰腺癌的相關(guān)性。netrin-1分子作為軸突引導(dǎo)過(guò)程中的重要分子，通過(guò)受體DCC，Neogenin，UNC5家族成員等分子介導(dǎo)了軸突沿netrin-1濃度梯度的生長(zhǎng)和排斥作用。除了參與神經(jīng)系統(tǒng)的軸突導(dǎo)向以外，netrin-1也在上皮組織來(lái)源器官的早期形成和分支發(fā)生過(guò)程中，發(fā)揮重要的功能，通過(guò)與受體相互結(jié)合，介導(dǎo)上皮組織的粘附和遷移等過(guò)程，從而構(gòu)建器官的正常形態(tài)和功能。此外，其受體是自身參與細(xì)胞凋亡過(guò)程的“依賴型受體”，所以netrin-1與腫瘤的相關(guān)性很早就得到了相當(dāng)?shù)年P(guān)注，其受體DCC以及UNC5家族部分成員(UNC5A，5B，5C)可以在配體netrin-1缺失時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過(guò)程而在存在netrin-1結(jié)合時(shí)抑制凋亡維持細(xì)胞的生存。netrin-1還參與到p53通路的調(diào)控過(guò)程，p53可以作為轉(zhuǎn)錄因子促進(jìn)UNC5B的表達(dá)，從而通過(guò)該依賴型受體誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過(guò)程，netrin-1與UNC5B的結(jié)合則可以阻斷p53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過(guò)程。

ITGB4和Integrin β4是同一種蛋白，只不過(guò)ITGB4表示基因，而Integrin β4 表示蛋白。Integrins β4在腫瘤研究較多，但是在PDAC中功能的研究相對(duì)較少。Integrin β4在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)均上調(diào)，如乳腺癌，膀胱癌，結(jié)直腸癌和胰腺癌等。并且Integrin β4表達(dá)越高，臨床預(yù)后越差。Integrin β4主要從以下幾方面參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展:穩(wěn)定細(xì)胞之間的黏附，促進(jìn)腫瘤遷移和侵襲，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，和促進(jìn)腫瘤血管的發(fā)生。Integrin β4可以調(diào)節(jié)細(xì)胞連接半橋粒結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。其下游主要與integrin連接激酶相結(jié)合，向細(xì)胞核內(nèi)傳遞信號(hào)。另外，Integrin β4可以與酪氨酸激酶受體相結(jié)合，如EGFR、ERBB2、Met和Ron。酪氨酸激酶的激活可以使Integrin β4激活，導(dǎo)致半橋粒的解聚，促進(jìn)細(xì)胞遷移。

早在2003年，Mayra Yebra等第一次證明Integrin α3β1和Integrin α6β4是netrin-1的受體，參與胰腺細(xì)胞中netrin-1介導(dǎo)的細(xì)胞黏附和遷移。

細(xì)胞遷移和侵襲是腫瘤細(xì)胞的重要特征。在PDAC細(xì)胞中，過(guò)表達(dá)Integrin β4可以促進(jìn)EMT，進(jìn)而促進(jìn)PDAC細(xì)胞的遷移和侵襲。提示Integrin與PDAC的遷移和侵襲相關(guān)。過(guò)表達(dá)Integrins可以激活轉(zhuǎn)錄因子AP1，進(jìn)而增加MMP9的表達(dá)水平。目前為止，只有為數(shù)不多的幾篇報(bào)道研究netrin-1在PDAC發(fā)生發(fā)展中的作用，只是在細(xì)胞水平發(fā)現(xiàn)netrin-1可以促進(jìn)PDAC的發(fā)生發(fā)展，但缺乏動(dòng)物水平的實(shí)驗(yàn)。而且netrin-1在PDAC中的作用受體，下游信號(hào)通路，以及netrin-1所調(diào)節(jié)的效應(yīng)基因等問(wèn)題都鮮有研究。對(duì)于netrin-1在腫瘤診斷、預(yù)防和治療中的應(yīng)用，特別是對(duì)胰導(dǎo)管腺癌診斷、預(yù)防和治療中的應(yīng)用目前更是鮮有研究。

發(fā)明內(nèi)容