[發明專利]一種蝦塘調水用益生菌菌制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201510334342.1
• 申請日: 2015-06-13
• 公開（公告）號: CN104877945A
• 公開（公告）日: 2015-09-02
• 發明（設計）人: 李琳;曲薈芬
• 申請（專利權）人: 格特生物制藥（天津）有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/125;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/01
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技術領域

本發明涉及一種蝦塘調水用益生菌菌制劑及其制備方法。

背景技術

快速發展的水產業集約化生產在提高經濟效益的同時也帶來新的問題。在集約化高密度養殖模式下，養殖水體自身污染非常嚴重，許多學者的研究表明，在養殖過程中餌料利用率較低，養殖過程中大量的殘餌、生物代謝物、動植物尸體等有機物積累于養殖池底，這些有機物在嫌氣細菌的作用下會腐敗分解產生大量對水產養殖動物有毒的物質，導致養殖水體的理化環境和生態環境嚴重惡化。另一方面，人類生活污水、各種工業廢水、農業廢水等的超量排放，污染了養殖用水水源，造成養殖水質下降，養殖環境惡化。

病原微生物種類增多和傳播速度加快，養殖生物病害發生日趨嚴重，給水產養殖業造成嚴重損失。據不完全統計，全國每年發生中等程度以上的養殖病害面積占養殖總面積的20％以上，年損失產量超過146多萬噸。隨著水產養殖規模的不斷擴大，集約化養殖程度的不斷提高，水產養殖池的富營養化程度越來越高。有機物的大量投放使殘餌、魚蝦的排泄物等富營養因子共存于一個水體，加上池塘自凈與調節能力的降低養殖水體中化學需氧量(COD)、生物耗氧量(BOD),氨氮、硝酸鹽與亞硝酸鹽、硫化物等。指標嚴重超標，池塘水質惡化，魚蝦病害頻頻發生有機物污染、氨氮、亞硝態氮積累是池塘養殖水體惡化，魚蝦病害發生和品質下降的主要誘因。

利用水體有益微生物實施生物修復是目前研究與開發的熱點，益生菌群調水具有無毒、無害、綠色、環保的優點，是未來養殖業發展的必然趨勢。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是:提供一種蝦塘調水用益生菌菌制劑及其制備方法。

本發明解決該技術問題所采用的技術方案是:微生態益生菌菌制劑主要是由枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌組成的混合菌群其中各類菌的重量百分比為:植物乳桿菌30-50％，沼澤紅假單胞菌10-30％，植物乳桿菌20-40％，布氏乳桿菌20-40％。

蝦塘調水用益生菌菌制劑的制備方法包括下述步驟：

1)活化菌種，分別搖瓶培養：枯草芽孢桿菌，沼澤紅假單胞菌用LB培養基，pH7-7.5，100-130℃高壓滅菌20-40分鐘，在30-38℃培養12-20小時。植物乳桿菌、布氏乳桿菌用MRS培養基，pH6-7，100-130℃高壓滅菌20-40分鐘，在25-35℃培養15-25小時；

2)枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌的一級液體擴大培養(50L罐)；接種量10％-20％；

3)枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌的二級液體擴大培養(500L罐)；接種量10％-20％:

4)以稻糠為載體分別固體擴大培養并固定化于稻糠上；

5)將固定化的枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌在30-40'C干燥、粉碎；

6)將枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌按以下配比混合：植物乳桿菌30-50％，沼澤紅假單胞菌10-30％，植物乳桿菌20-40％，布氏乳桿菌20-40％。

本發明的有益效果：

1)將益生菌固定化于稻糠上，使每克菌制劑的有效活菌數(CFU)可高達1000億個。由于稻糠呈網狀結構，具有較大的比表面積，所以能在單位體積內附著吸附更多的菌體。

2)以每畝蝦池每天200克使用量，沿池邊潑灑，兩天后可明顯降低池中氨氮、亞硝酸鹽的濃度。

3)每周使用一次，可有效防治池中藍藻的爆發。

具體實施方式

實施例l

按下列步驟進行菌制劑的制備:

1)將4℃保存的各菌種斜面活化，分別搖瓶培養(500ml-2L)。枯草芽孢桿菌沼澤紅假單胞菌用LB培養基培養，具體配方如下：胰蛋白胨10克，酵母抽提物10克，氯化鈉5克，蒸餾水1000mL，pH7.3，121℃滅菌20分鐘。35℃培養15小時。植物乳桿菌、布氏乳桿菌用MRS酪蛋白胨10.0克，牛肉浸取物10.0克，酵母提取液5.0克，葡萄糖5.0克，乙酸鈉5.0克，檸檬酸二胺2.0克，吐溫-801.0克，磷酸氫二鉀2.0克，七水硫酸鎂0.2克，七水硫酸錳0.05克，碳酸鈣20.0克，蒸餾水1.0升，pH6.8，121℃滅菌20分鐘。30℃培養22小時。

2)一級液體擴大培養枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、布氏乳桿菌分別單獨擴大培養，培養基和培養條件同上(50L罐)，接種量20％。

3)二級液體分別擴大培養(500L罐)，接種量20％。