[發明專利]產具有多種酶活性的枯草芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201510330366.X
• 申請日: 2015-06-15
• 公開（公告）號: CN105441350B
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 張國慶;管博文;趙曉萌;王壽南;李相陽;郁東寧;蔣雪珍;楊玉婷;王珊珊
• 申請（專利權）人: 北京農學院;北京蘑食屋生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/56;C12N9/42;C12R1/125
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

本發明公開了產具有多種酶活性的枯草芽孢桿菌及其應用。本發明的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN?01CGMCC No.9754菌株對人類和環境均無害，使用安全；該菌株能夠產生具有溶解血栓活性、納豆激酶活性(溶纖活性)和纖維素酶活性的代謝物，是一種能夠產具有多種酶活性的枯草芽孢桿菌。在培養48h后，BUABN?01菌株發酵液中的溶纖活性為3297.0IU/mL發酵液，纖維素酶活力為0.1IU/mL發酵液，血栓溶解率達到40％以上。枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN?01CGMCC No.9754培養條件簡單、容易保存，適于工業化生產，具有良好的開發應用前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中產具有多種酶活性的枯草芽孢桿菌及其應用。

背景技術

芽孢桿菌屬于厚壁菌門(Firmicutes)，是能形成芽孢(內生孢子)的桿菌，它們對外界有害因子抵抗力強。目前，研究最多的芽孢桿菌有：枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、蠟樣芽孢桿菌(B.cereus)、蘇云金芽孢桿菌(B.thuringiensis)、炭疽桿菌(B.anthracis)、嗜堿芽孢桿菌(B.alcalophilus)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、嗜氣芽孢桿菌(B.aerophilus)等。其中，枯草芽孢桿菌(B.subtilis)是一種多功能的微生物，在飼料工業、污水處理、生物肥發酵和發酵床制作中具有廣泛應用。

目前臨床上治療血栓的藥物，都具有一定的局限性，如毒性強、副作用大、生產成本高、價格昂貴及體內半衰期比較短等。微生物具有體積小、結構簡單、生長繁殖快、代謝旺盛等特征，如果能找到可以產生具有溶栓活性的代謝物且安全性好的細菌(如枯草芽孢桿菌)，就能開發新一代的溶栓劑或保健食品。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何利用微生物制備具有多種酶活性的物質。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了一株枯草芽孢桿菌。

本發明所提供的枯草芽孢桿菌是枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN-01，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的登記入冊編號為CGMCC No.9754。該菌種已于2014年10月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)。

本發明的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN-01 CGMCC No.9754在牛肉膏蛋白胨培養基上菌落生長迅速。菌落表面初期光滑，后期粗糙不透明，白色至污白色，邊緣初期光滑后變粗糙。菌株細胞大小為(0.7-0.8)μm×(2-3)μm，著色均勻。培養24小時以上大量形成芽孢。無莢膜，周生鞭毛，能運動。

為解決上述技術問題，本發明還提供了一種菌劑。

本發明所提供的菌劑，它的活性成分是所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN-01 CGMCC No.9754和/或所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BUABN-01CGMCCNo.9754的代謝物。

所述菌劑具有下述1)-4)中的至少一種功能：

1)具有產溶栓活性(溶解血栓活性)的物質的功能；

2)具有產溶纖活性的物質的功能；

3)具有產納豆激酶活性的物質的功能；

4)具有產纖維素酶活性的物質的功能。