[發(fā)明專利]一種微球載體及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510325843.3
• 申請日: 2013-02-27
• 公開（公告）號: CN105403697B
• 公開（公告）日: 2018-01-02
• 發(fā)明（設計）人: 徐宏;古宏晨;王葉菲
• 申請（專利權(quán)）人: 中翰盛泰生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: G01N33/553
• 分類號: G01N33/553;G01N33/535
• 代理公司: 上海旭誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司31220
• 代理人: 鄭立

本申請是以下申請的分案申請：申請日：2013年2月27日；申請?zhí)枺?01310062308.4；發(fā)明名稱：“一種磁性微球載體及其制備方法”。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及一種生物材料載體及其制備和應用，尤其涉及一種提高體外診斷檢測靈敏度的磁性微球載體及其制備方法。屬于生物材料技術(shù)領域。

背景技術(shù)

磁性微球作為體外診斷的固相載體，起到識別、捕獲、控制與運輸目標待檢分子的載體作用。由于其在整個反應過程中均是懸浮在待檢樣本中，與傳統(tǒng)的多孔板載體相比，其整個反應基本處于液態(tài)或準液態(tài)狀態(tài)，載體與待檢物之間發(fā)生分子碰撞的幾率大大增加。另外，由于磁性微球較大的表面積提高了負載目標待檢分子的效率，因而使得其生物反應效率較傳統(tǒng)多孔板方式大為提高；一般多孔板上的生物反應需要在1～3小時之間，而基于磁性微球的生物反應僅需十幾分鐘。另外，由于磁性微球卓越的超順磁特性，使得采用全自動磁性分離方式與檢測可以輕松地實現(xiàn)。

目前，體外診斷領域應用的磁性微球載體主要為粒徑在100nm以下的磁性顆粒以及粒徑在1μm以上(通常為幾微米)的磁性微球兩類。粒徑在100nm以下的磁性顆粒，由于具有極大的比表面積，可以顯著提高識別與捕獲待檢目標生物分子的反應動力學以及捕獲目標生物分子的能力，進而提高體外診斷的檢測靈敏度與檢測效率。但是，納米尺度的磁性顆粒對外磁場的響應程度低，不易被磁場操控；且極易發(fā)生團聚而在實際應用過程中起不到納米尺度效應，從而無法在目前主流的全自動體外診斷檢測系統(tǒng)中作為高效固相載體使用。另一方面，微米尺度的磁性微球，由于其包含大量的磁性顆粒，雖然可以方便地實現(xiàn)全自動檢測，但是微球載體的表面積比納米磁性顆粒大大降低，從而以其為載體時的檢測靈敏度與反應效率也大為降低。

經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)的文獻檢索發(fā)現(xiàn)，Matsunaga等在《Analytica Chimica Acta》第597卷331-339頁發(fā)表的“基于beads on beads復合物的用于全自動免疫檢測的磁性微球檢測PSA特異性抗原”(Fully automated immunoassay for detection of prostate-specific antigen using nano-magnetic beads and micro-polystyrene bead composites，′Beads on Beads′”)中報道了利用beads on beads結(jié)構(gòu)，將納米尺度的磁性顆粒通過生物素結(jié)合到表面連接有親和素的微米尺度的聚苯乙烯微球上，一方面提高了磁性微球的表面積，另一方面又克服了納米尺度的磁性顆粒對外磁場的弱響應性以及極易團聚等問題。但是該文并沒有對這種beads on beads特殊的拓撲結(jié)構(gòu)與光滑的微米尺度微球在體外診斷的檢測靈敏度進行對比研究，即沒有闡釋這種特殊的拓撲結(jié)構(gòu)是否可以提高體外診斷的檢測靈敏度。另外，由于該報道所采用的組裝技術(shù)為鏈霉親和素與生物素的親合作用，因此需要經(jīng)過高達十余次的多次反復組裝才能實現(xiàn)納米尺度的磁性顆粒在微米尺度上的微球較高密度組裝，整個制備過程復雜，且成本昂貴。

進一步檢索發(fā)現(xiàn)，Tan等在《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》第383卷738-746頁發(fā)表的“球狀生物功能核殼納米顆粒微結(jié)構(gòu)層在蛋白陣列上提高反應表面積”(Microstructured layers of spherical biofunctional core-shell nanoparticles provide enlarged reactive surfaces for protein microarrays)中報道了在平板基片上通過組裝納米尺度的微球，再以此作為固相載體，開展對模式蛋白的檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)檢測靈敏度得到較大提升。但是，由于采用的固相載體為平板基片，其與待檢分子間的反應完全通過分子的擴散來實現(xiàn)，使得反應動力學較微球大為降低。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種制備方法簡單、可提高體外診斷檢測靈敏度的磁性微球載體。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種提高體外診斷檢測靈敏度的磁性微球載體及其制備方法。