[發(fā)明專利]一種具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510324672.2
• 申請日: 2015-06-11
• 公開（公告）號: CN104926923B
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊慶華;鄭磊;張新晴;王強(qiáng)盛
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K7/02
• 分類號: C07K7/02;C07K14/00;C07K1/06;C07K1/02
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 喬恒婷

本發(fā)明公開了一種具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽及其制備方法，其中抗非特異性蛋白質(zhì)吸附的隱形多肽的結(jié)構(gòu)式為：本發(fā)明隱形多肽由天冬氨酸的γ?羧基和賴氨酸的α?氨基共價連接的二聚體縮聚而成，能夠解決抗非特異性蛋白吸附材料所必需的等量、均勻分布電荷以及甲基丙烯酸類和聚乙二醇類材料作為藥物載體時的生物不可降解性等問題。

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種多肽及其制備方法，具體地說是一種具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽及其制備方法。

二、背景技術(shù)

對于生物材料而言，依然沒有完全解決的一個問題是材料表面的非特異性蛋白質(zhì)吸附。它是導(dǎo)致血栓形成、炎癥反應(yīng)，甚至生物材料失效的主要因素之一。聚乙二醇(PEG)在生物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域有廣泛的用途，但是在長期與生理血液接觸的條件下，它容易氧化，甚至被降解。一般認(rèn)為，兩性離子類抗非特異性蛋白質(zhì)吸附材料的穩(wěn)定性比PEG優(yōu)良，其中最典型的是羧基甜菜堿(CBMA)、磺酸基甜菜堿(SBMA)以及磷酰膽堿(MPC)等，它們都屬于甲基丙烯酸酯類材料。但是，當(dāng)PEG類以及甲基丙烯酸酯類聚合物作為基因或者納米藥物載體時，在長期給藥的情況下，由于其生物不可降解性，宿主細(xì)胞缺乏相應(yīng)的代謝機(jī)制從而造成聚合物在細(xì)胞內(nèi)的累積，這樣會干擾宿主細(xì)胞的正常代謝，對宿主細(xì)胞造成傷害甚至引起宿主細(xì)胞死亡。多肽類材料由于其良好的生物相容性和生物可降解性而引起廣泛的關(guān)注。Chen S.F.等通過谷氨酸N-羧基內(nèi)酸酐(Glu-NCA)和賴氨酸N-羧基內(nèi)酸酐(Lys-NCA)混合開環(huán)聚合(ROP)的方法得到了具良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的多肽。但是，由于兩種單體的反應(yīng)活性差異以及不同批次的單體純度難以控制而很難得到正負(fù)電荷均勻分布的多肽。Jiang S.Y.組通過固相有機(jī)合成方法制備出由帶負(fù)電荷的谷氨酸(E)和帶正電荷的賴氨酸(K)構(gòu)成的含4-6個EK單元的寡肽，它顯示了良好的抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能。但是該方法依賴于氨基酸合成儀，效率低、耗費大，尤其對于大分子量多肽而言制備效率更低。ChenH.等設(shè)計了由寡乙二醇甲基丙烯酰氯(OEGMA-Cl)與保護(hù)性賴氨酸的α-氨基反應(yīng)得到的賴氨酸寡乙二醇甲基丙烯酸酯(OEGMA-lysine)，經(jīng)聚合后得到的高聚物具有由OEG提供的優(yōu)良抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能以及由賴氨酸側(cè)鏈提供的與纖溶酶原(plasminogen)特異性結(jié)合的功能。盡管這種材料顯示了良好的抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能，但其生物不可降解性問題依然存在。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽及其制備方法，能解決經(jīng)典的聚甲基丙烯酸酯類抗非特異性吸附蛋白質(zhì)材料的生物不可降解性等難題。所謂隱形，是指材料本身能阻止蛋白質(zhì)在其表面的非特異性吸附，避免了被人體免疫系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)并被清除，甚至引起機(jī)體排異反應(yīng)的機(jī)會，從而實現(xiàn)對人體免疫系統(tǒng)的隱身。

本發(fā)明具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽的結(jié)構(gòu)式如下：

其中，n表示兩種單體的聚合度，n＝10-30。

本發(fā)明具有良好抗非特異性蛋白質(zhì)吸附性能的隱形多肽的制備過程如下：

1)縮合

將保護(hù)性賴氨酸、保護(hù)性天冬氨酸、縮合劑以及消旋抑制劑溶于有機(jī)溶劑中，在氮氣氣氛中于室溫下密閉反應(yīng)48h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，得黃色油狀物；將黃色油狀物溶于乙酸乙酯中，依次用10wt.％(質(zhì)量濃度，下同)檸檬酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌，分液，收集有機(jī)相；有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鈉干燥后旋蒸脫除溶劑，硅膠柱色譜分離(流動相：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3：1(體積比))得中間體1，為白色固體，直接用于下一步反應(yīng)；

中間體1的結(jié)構(gòu)式如下：

其中，R₁為

R₂為