[發明專利]一種竹蟶活性八肽及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 201510323720.6 | 申請日: | 2015-06-12 |
| 公開(公告)號: | CN105315343B | 公開(公告)日: | 2020-11-06 |
| 發明(設計)人: | 黃芳芳;丁國芳;楊最素;余方苗 | 申請(專利權)人: | 浙江海洋學院 |
| 主分類號: | C07K7/06 | 分類號: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/20;A61K38/08;A61P35/00;A23L33/18 |
| 代理公司: | 寧波誠源專利事務所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠衛;陳蕾 |
| 地址: | 316111 浙江省舟*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 活性 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種竹蟶活性八肽,其氨基酸序列為:Ala-Pro-His-Asp-Asp-Gln-Asn-His,ESI/MS檢測分子量為933.1Da。
2.如權利要求1所述的竹蟶活性八肽的制備方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)新鮮竹蟶去殼取肉,洗凈后搗碎,按料液比1:1加水進行組織勻漿,勻漿后調節勻漿液pH值為9.6備用;
(2)在上述勻漿液中加入堿性蛋白酶進行酶解,獲得酶解樣品,酶解溫度為50℃,加酶量為300U/g竹蟶肉,酶解時間為8h,酶解完成后于95~100 ℃、10~15min 進行滅酶;
(3)將上述酶解樣品過5KD超濾膜進行超濾,收集分子量小于5KD的酶解液進行冷凍干燥;
(4)對步驟(3)中收集的酶解液進行G-25凝膠分離,收集洗脫峰1;
(5)對步驟(4)中收集的洗脫峰1進行反相高效液相色譜純化,收集各峰組分并進行氨基酸測序,獲得所述竹蟶活性八肽;
前述反相高效液相色譜條件為:Zorbax SB-C18色譜柱 4.6×250mm 5um,檢測波長280nm/214nm,柱溫為20℃,進樣量為100ul,梯度洗脫,流速為1.0ml/min,流動相A為0.06%TFA,B為0.05%TFA的乙腈,洗脫程序:0%~0%B 洗脫4分鐘,0%~7%B 洗脫25分鐘,7%~100%B 洗脫1分鐘,100%~100%B 洗脫5分鐘。
3.一種如權利要求1所述的竹蟶活性八肽在制備抗前列腺癌藥物中的應用。
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