[發明專利]具有氨芐青霉素抗性的長雙歧桿菌及其制劑的制備與應用

有效

• 申請號: 201510323614.8
• 申請日: 2015-06-12
• 公開（公告）號: CN105176857B
• 公開（公告）日: 2019-02-12
• 發明（設計）人: 孫晗笑;田鵬;楊妍;利時雨;丁清;韋丕金;劉照兵;黃俊麗
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/747;A61K35/745;A61P1/00;C12R1/01;C12R1/23
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;陳燕嫻

本發明公開具有氨芐青霉素抗性的長雙歧桿菌及其制劑的制備與應用。本發明用人體糞便在抗生素壓力下分離得到2株具有耐藥性的乳酸菌，并進行了抗生素敏感性實驗，以及檢測是否存在質粒DNA；采用PCR擴增分析菌株的耐藥基因定位情況，探索了乳酸菌耐抗生素的分子機制，并對篩選具有抗性基因乳酸菌進行安全性評價；對篩選的抗性菌株進行驗證是否對腸道失調具有調節作用，采用“抗生素型腸道菌群失衡模型”，旨在為臨床上使用抗生素引起的腹瀉、菌群失調等疾病提供潛在的治療方法。本發明獲得的菌株，當臨床再次使用抗生素時，腸道益生菌能夠在抗生素壓力下存活，而普通的益生菌則不能存活，因此，可為臨床上抗生素引起的腹瀉提供治療方法。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別涉及具有氨芐青霉素抗性的長雙歧桿菌及其制劑的制備與應用。

背景技術

在人體定居著大量的微生物，其中主要的就是細菌類，正如我們所知道的它能夠定居在人體腸道中，形成復雜的群體或者微生態體系。據統計健康成人的腸道棲息著1014個細菌，是人體細胞總數的10～20倍，有多達近500余種細菌，腸道細菌是人體最龐大、最重要的組成部分，平均每1克大便的細菌數量達到10¹²。機體的宿主細胞、腸道微生物和其他微生物構成了一個復雜的系統，相互影響形成了多種生物學效應。

腸道益生菌(Probiotic)是一類與宿主互利共生、有利于宿主健康的腸道細菌。當前，國內外普遍公認的安全性益生菌菌種主要為乳桿菌屬Lactobacillus和雙歧桿菌屬Bifidobacterium，這兩類菌可以在健康成年人的腸道菌群中出現。其他用作益生菌的還有鏈球菌Streptococcus sp.、乳球菌Lactococcus sp.、腸球菌Enterococcus sp.、擬桿菌Bacteroides sp.、芽孢桿菌Bacillus sp.、丙酸菌Propionibacterium sp.及真菌Fungi等。

腸道益生菌成分組成了機體重要功能，負責3個主要功能：抵制病原微生物的定植；提供營養；免疫調節。益生菌能夠結合腸道上的位點，抑制病原微生物的結合，這種潛在的機制可能是有益菌能夠產生保護效應抵制病原菌，包括競爭營養或者附著位點，產生抑制新城代謝和抗病原菌作用，調節毒素的產生和活性。有益微生物通過提高日常飲食多糖的分解效應和提供維生素，從而有助于為宿主提供營養。許多研究已經證實益生菌能刺激與獲得性免疫相關的功能，激活淋巴細胞并刺激抗體生成，能提高機體的特異性及非特異性免疫功能，對腹瀉、炎癥、心血管疾病、肥胖等都具有潛在應用價值。

由于抗生素能殺死細菌，在疾病的救治中也發揮了不可替代的作用，在醫療領域得到了廣泛的應用。但是，長期使用抗生素及抗生素的濫用，使許多人腸道致病細菌獲得耐藥性，同時也抑制體內的有益菌，使腸道菌群失衡，從而引起疾病的發生。抗生素所致的腸道生態平衡的改變，可能會導致生態系統抗移植性的丟失和腸病原的過度繁殖，耐藥性菌株和條件致病菌的過度生長，有益微生物的抑制，改變腸道生物菌群的功能。