[發明專利]一種基于結核特異性IL-31檢測的診斷結核分枝桿菌感染的試劑盒

在審

• 申請號: 201510317166.0
• 申請日: 2015-06-10
• 公開（公告）號: CN104897893A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 高巖;邵凌云;張文宏;吳晶;張冰琰
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬華山醫院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 竺路玲

技術領域

本發明涉及生物醫療領域，尤其涉及一種利用IL-31診斷結核分枝桿菌感染的診斷試劑盒以及使用該診斷試劑盒診斷結核分枝桿菌感染的方法。

背景技術

結核病是嚴重危害人類健康的感染性疾病，是目前世界上死亡率最高的慢性傳染病。上個世紀80年代人們曾經一度認為已控制了這種疾病，但近年來結核病的發病及死亡率呈上升趨勢，據世界衛生組織結核病最新報告中顯示：目前全球平均患病人數為1400萬人，有880萬新發活動性結核病患者，2010年平均有110萬HIV陰性人口死于結核病,平均有35萬人口死于HIV合并結核病；一個具有傳染性的結核病患者每年可份致10-15人感染結核分支桿菌。因此，結核病對全人類的生命健康威脅仍然十分嚴峻。我國是個結核病高發國家，結核病長期危害著我國人民健康，2010年我國耐多藥結核分枝桿菌發病率居世界第二，每年新增活動性結核病患者約150萬人，受感染人數約5億，而每年因結核病死亡者達25萬人，同時HIV感染的快速增長使我國結核病的控制面臨著巨大的挑戰，進一步闡明結核的免疫發病機制，為開發新型診斷手段、疫苗及免疫治療藥物提供有用的信息已經成為眾多研究者的共同目標。

結核分枝桿菌是一種胞內需氧致病菌，通常先由呼吸道進入人體，然后通過淋巴管或血液播散到其他部位，感染后2-6周人體細胞免疫逐步形成，淋巴細胞、大量的巨噬細胞大量流向感染病灶部位形成肉芽腫，細菌在巨噬細胞內不斷生長直至巨噬細胞死亡，細菌重新釋放至感染病灶。在這一過程中結核分枝桿菌與機體免疫細胞相互作用主要發生在天然免疫和獲得性免疫應答兩個方面，而通常會出現三種結局：天然免疫系統清除結核菌、結核分枝桿菌在宿主體內大量增殖導致活動性結核(Active?tuberculosis，ATB)或者結核分枝桿菌以靜止狀態長期存活于肉芽腫和巨噬細胞內其長期被宿主免疫反應所控制，但又不被清除，從而導致潛伏性結核分枝桿菌感染(Latent?tuberculosis?infection，LTBI)狀態。保守估計全球約有三分之一約20億人口是潛伏性結核感染，這部分患者終身發發展為活動性結核幾率為5-10％，患者將感染控制于潛伏狀態還是發展為活動性結核狀態中，獲得性免疫應答起著關鍵作用。

當天然免疫應答無法從根本上控制結分枝桿菌繁殖時，在持續暴露于結核分枝桿菌抗原的情況下機體啟動獲得性免疫應答反應。由于結核分枝桿菌寄生在巨噬細胞內部，因此獲得性免疫應答中細胞介導的較抗體介導的保護性免疫應答更重要種T細胞亞群參與了細胞免疫應答，CD4⁺T細胞在結核免疫中起重要保護作用，CD4⁺效應T細胞主要通過分泌干擾素-γ(IFN-γ)激活巨噬細胞減滅細菌，同時分泌白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等細胞因子參與免疫保護。CD8⁺T細胞/γδT細胞通過分泌IFN-γ、穿孔素(Perforin)、顆粒酶(Granzyme)等在結核免疫保護中亦發揮重要作用。除了上述細胞外Th17、Th22、NKT等參與了結核的保護性免疫應答反應。

結核性胸膜炎伴胸腔積液是臨床上最常見的肺外結核，結核分枝桿菌對胸膜的侵犯與遲發型變態反應是結核性胸膜炎發病機制中的兩個重要環節。炎癥過程使胸膜血管通透性增加，富含蛋白質和特異的淋巴細胞的液體聚集在胸膜腔中，在這一過程中多種T細胞亞群參與了結核性胸膜炎的免疫應答反應，包括Th1、Th2、Th9、Th17、Th22等，其分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IL-22等參與結核的免疫應答反應。