[發(fā)明專利]一種經(jīng)基因工程改造金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶及其制備方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510315209.1 | 申請日： | 2015-06-10 |
| 公開（公告）號： | CN104862297B | 公開（公告）日： | 2018-02-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 周艷;王冉;張輝;包紅朵;孫利廠 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/51;A61P31/04 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210014 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基因工程 改造 金黃色 葡萄球菌 噬菌體 裂解 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種經(jīng)基因工程改造的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶，其特征在于，該金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1。
2.一種經(jīng)基因工程改造的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的編碼基因，其特征在于，該金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2 所示。
3.一種包含權(quán)利要求2 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的編碼基因的質(zhì)粒。
4.一種包含權(quán)利要求3所述的質(zhì)粒的重組菌。
5.權(quán)利要求1 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
(1) 將SEQ ID NO：2 所示核苷酸序列克隆到表達載體中，得到重組質(zhì)粒；
(2) 將步驟(1)得到的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主菌，得到重組菌；
(3) 利用重組菌表達金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶；
(4) 純化步驟(3)得到的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求5 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的表達載體為pET32b(+)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的宿主菌為大腸桿菌TransB (DE3)。
8.根據(jù)權(quán)利要求5 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，利用IPTG 誘導(dǎo)重組菌表達金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶，IPTG 的濃度為1.0~1.2 mmol/L，誘導(dǎo)表達的溫度為20~26℃。
9.權(quán)利要求5~7 任一項所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶的制備方法制備得到的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶。
10.權(quán)利要求9 所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶在制備抑制金黃色葡萄球菌生長的藥物中的應(yīng)用。
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