[發(fā)明專利]一種抗病毒杜仲提取物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510311862.0
• 申請日: 2015-06-09
• 公開（公告）號: CN104958346A
• 公開（公告）日: 2015-10-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐蒙蒙
• 申請（專利權(quán)）人: 徐蒙蒙
• 主分類號: A61K36/46
• 分類號: A61K36/46;A61P31/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種杜仲提取物及含有該提取物的藥物制劑，該杜仲提取物可以用來制備抗病毒藥物。

背景技術(shù)

杜仲Eucommia?ulmoides?Oliv.屬被子植物門，杜仲科，杜仲屬，落葉喬木，高達(dá)20m，樹皮灰褐色，連同枝、葉、根均含膠，折斷有銀白色細(xì)絲。葉橢圓或橢圓伏卵型，長6～18cm，邊緣有鋸齒，下邊脈上有毛，葉柄長1～2cm，果為翅果扁平而薄，內(nèi)含一種子。杜仲作為中藥在我國已有2000多年的藥用歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》和《本草綱目》均將其列為上品，其具有多種功效，主要用于治療腎虛腰痛，筋骨無力，妊娠漏血，胎動不安，高血壓癥。

近年來，各國學(xué)者對杜仲化學(xué)成分進(jìn)行了大量研究，目前分離得到并經(jīng)鑒定的有機(jī)化合物有70種以上，無機(jī)礦物元素不少于15種。研究發(fā)現(xiàn)，杜仲皮、花、葉和枝條等各部分中含有相似的化學(xué)成分，主要包括木脂素類、環(huán)烯醚萜類、黃酮類和甾體類等有機(jī)化合物。現(xiàn)代藥理學(xué)證明，杜仲具有多種功能活性，如降血壓、抗衰老、抗癌、抗菌、鎮(zhèn)痛、消炎，利尿、鎮(zhèn)靜、安神，抗病毒作用，增強(qiáng)機(jī)體非特異免疫力，并能對細(xì)胞免疫進(jìn)行雙相調(diào)節(jié)等功效，另外對神經(jīng)中樞也有一定作用。杜仲也因其顯著的生理活性得到了眾多學(xué)者的關(guān)注。

現(xiàn)代研究表明，有些植物不但具有調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，還具有非特異性的抗病毒功能。S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶（S-Adenosyl-L-homocysteine?hydrolase，SAH水解酶）是一類具有獨(dú)特廣譜抗病毒活性的腺苷衍生物的作用靶，尤其是抗出血熱病毒抑制劑的目的靶，廣泛存在于脊椎動物（如人、牛、狗、兔、大鼠、小鼠）、植物、真菌及其他微生物細(xì)胞內(nèi)，具有重要的生理功能。SAH水解酶與轉(zhuǎn)甲基作用密切相關(guān)，真核細(xì)胞及病毒mRNA?5’-末端必須具有甲基化的帽狀結(jié)構(gòu)，才能進(jìn)行翻譯。mRNA?5’-末端甲基化依賴于腺苷甲硫氨酸的多種甲基轉(zhuǎn)移酶催化，SAH是酶反應(yīng)產(chǎn)物，亦是該酶的競爭性反饋抑制劑。SAH水解酶可將SAH水解成腺苷及L-高半胱氨酸，該反應(yīng)是可逆的，體外趨向合成，體內(nèi)趨向水解。體內(nèi)轉(zhuǎn)甲基化產(chǎn)生的SAH被SAH水解酶不斷水解，使轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行，無SAH的累積。如SAH水解酶被抑制，細(xì)胞內(nèi)SAH積累，抑制轉(zhuǎn)甲基酶，進(jìn)而影響mRNA功能，病毒蛋白不能合成，也就不能生成子代病毒，病毒復(fù)制受到抑制。大多數(shù)病毒mRNA需甲基化的帽狀結(jié)構(gòu)，且對轉(zhuǎn)甲基酶的抑制比細(xì)胞mRNA敏感，細(xì)胞內(nèi)SAH濃度稍有增加，便首先受到波及，此特點(diǎn)賦于SAH水解酶抑制劑有選擇性。因此，SAH水解酶在國際上被用于作為篩選抗出血熱病毒抑制劑的體外篩選模型。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種杜仲提取物，該提取物的制備方法和液相分析方法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備抗病毒藥物的用途。

本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：

一種杜仲提取物，該提取物由以下方法制備：

步驟一：杜仲藥材粉碎，水蒸汽蒸透，烘干；

步驟二：用85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；

步驟三：對步驟二濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；

步驟四：正丁醇萃取物用AB-8大孔樹脂富集，先用15%乙醇沖洗7個(gè)柱體積除去多糖，再用60%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。

進(jìn)一步地，步驟一中蒸制方法為：高壓滅菌鍋120℃蒸制4小時(shí)。

為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的杜仲提取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：

色譜柱：Agilent?Zorbax?SB-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；

流動相：A為乙腈，B為0.4%磷酸溶液；

梯度洗脫程序：0.01~10min，A?10%→15%；10~30min，A?15%→48%；30~55min，A?48%→78%；55~65min，A?78%→10%；

流動相流速：1.0mL·min^-1；

檢測波長：360nm；柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：10μL。

藥物制劑，含有治療有效量的所述杜仲提取物和藥學(xué)上可接受的載體。

所述的杜仲提取物在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。

所述的藥物制劑在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。