[發(fā)明專利]一種孔狀石墨烯?辣根過氧化酶修飾玻碳電極的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510298766.7
• 申請日: 2015-06-03
• 公開（公告）號: CN105044186B
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發(fā)明（設計）人: 劉秀輝;劉一丹;李琳;盧娟娟;盧小泉
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司62002
• 代理人: 馬正良

1.一種孔狀石墨烯-辣根過氧化酶修飾玻碳電極的制備方法，其步驟為：

a. 制備氧化石墨烯

用修正的Hummers法制備氧化石墨烯：首先量取濃硫酸，冰水浴冷卻至-4℃，攪拌條件下，依序緩慢加入石墨粉、硝酸鈉和高錳酸鉀，控制反應溫度在8℃～12℃，攪拌反應2h；然后將混合液移入三口燒瓶，在30℃下繼續(xù)攪拌30min，得到糊狀物；保持攪拌不變，在糊狀物中連續(xù)加入去離子水，升溫至98℃，反應30min后，在攪拌下滴加30 % H₂O₂直至無氣泡冒出，產物由棕褐色變?yōu)榱咙S色；離心分離產物，分別用5 % 鹽酸和蒸餾水離心洗滌產物，得氧化石墨；將制得的氧化石墨超聲剝離，離心除去下層未剝離的氧化石墨，得到上層混合液即為氧化石墨烯；最后用0.22μm微孔濾膜過濾，水洗4次，低壓冷凍干燥，將干燥后的氧化石墨烯配成1.0mg·mL^-1的分散液，待用；

b. 制備銀納米粒子-石墨烯復合材料

用“一鍋法”制備銀納米粒子-石墨烯復合材料：稱取十六烷基三甲基溴化銨溶解在水中，將十六烷基三甲基溴化銨水溶液與氧化石墨烯分散液混合超聲1h，得到十六烷基三甲基溴化銨功能化的氧化石墨烯，備用；再將3 % 氨水滴入硝酸銀水溶液中，直到產生的白色沉淀消失，制得銀氨溶液；接著將銀氨溶液滴入十六烷基三甲基溴化銨功能化的氧化石墨烯中，在N₂保護下充分攪拌2h，最后在攪拌下加入硼氫化鈉水溶液，在80℃下反應12h，使銀離子與氧化石墨烯一起還原，制得銀納米粒子-石墨烯復合材料；

產物用0.22μm微孔濾膜過濾，水洗4次，低壓冷凍干燥，備用；

c. 制備孔狀石墨烯

將制得的銀納米粒子-石墨烯復合材料超聲分散在水中，加入硝酸溶液，在室溫下攪拌4天，除去銀納米粒子；

最終產物用0.22μm微孔濾膜過濾，水洗4次，低壓冷凍干燥，制得孔狀石墨烯，備用；

d. 玻碳電極預處理

玻碳電極依次用0.30μm、0.05μm的三氧化二鋁懸濁液拋光成鏡面，再依次經體積分數為95 %的乙醇、二次蒸餾水超聲清洗后，得到處理后的玻碳電極；插入含有1.0mM鐵氰化鉀探針分子的0.1M氯化鉀電解質溶液中，并采用以玻碳電極為工作電極、鉑柱為對電極、飽和甘汞電極為參比電極的三電極體系進行循環(huán)伏安掃描，對裸玻碳電極進行表征；再將電極取出用二次蒸餾水沖洗并吹干，備用；

e. 制備孔狀石墨烯-辣根過氧化酶修飾電極

將c 步驟得到的孔狀石墨烯滴涂在上述處理好的玻碳電極上，室溫下干燥制得孔狀石墨烯修飾玻碳電極；再將辣根過氧化酶滴涂在孔狀石墨烯修飾玻碳電極上，室溫下干燥制得孔狀石墨烯-辣根過氧化酶修飾玻碳電極；

f. 采用步驟e所得到的孔狀石墨烯-辣根過氧化酶修飾玻碳電極為工作電極、鉑柱為對電極、飽和甘汞電極為參比電極，組成三電極體系，并將其共同浸入含有1.0mM H₂O₂的N₂飽和的0.2M pH=7.0的磷酸鹽緩沖溶液中進行循環(huán)伏安掃描，得到HRP/PGN/GCE修飾電極對H₂O₂的循環(huán)伏安曲線；

g. 采用origin軟件作圖，繪制不同修飾電極在含有1.0mM H₂O₂的N₂飽和的0.2M pH=7.0的磷酸鹽緩沖溶液中對H₂O₂的循環(huán)伏安圖。