[發明專利]一種基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+構建的真菌毒素類和激素類電致化學發光傳感器的制備方法及應用有效
| 申請號： | 201510296790.7 | 申請日： | 2015-06-03 |
| 公開（公告）號： | CN104865242A | 公開（公告）日： | 2015-08-26 |
| 發明（設計）人： | 魏琴;呂曉輝;王曉東;馬洪敏;曹偉;杜斌;吳丹;胡麗華;李賀;羅川南;龐雪輝;張勇 | 申請（專利權）人： | 濟南大學 |
| 主分類號： | G01N21/76 | 分類號： | G01N21/76 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 250022 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 npco co sub au rusi ru bpy sup 構建 真菌 毒素 激素類 | ||
技術領域
本發明涉及一種基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+構建的真菌毒素類和激素類電致化學發光傳感器的制備方法及應用。具體涉及一種RuSi@Ru(bpy)32+作為發光材料，納米復合物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+作為捕獲抗體基底的電致化學發光傳感器的制備與應用，屬于電致化學發光檢測技術領域。
背景技術
真菌毒素是廣泛存在于自然界的農產品污染物，真菌毒素具有強烈的腎臟毒性，肝臟毒性和神經毒性，并且有致畸、致癌和致突變作用。真菌毒素的存在對人類和動物健康以及畜牧業發展構成了巨大的威脅。激素是由人和動物某些細胞合成和分泌、能調節機體生理活動的特殊物質，和神經系統一起調節人體的代謝和生理功能。正常情況下各種激素是保持平衡的，如因某種原因使這種平衡打破了這就造成內分泌失調，會引起相應的臨床表現。因此，可利用測定真菌毒素和激素的含量來判斷農產品污染狀況及疾病診斷。
目前真菌毒素和激素的檢測方法主要是色譜分析和免疫分析法，例如薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法。雖然色譜分析靈敏度很高，但是色譜分析需要繁瑣的樣品預處理、預富集、儀器操作步驟復雜等缺點。為了克服以上色譜分析方法的缺點，本發明設計了一種簡單、快速、靈敏度和選擇性高的電致化學發光免疫分析方法。
本發明利用RuSi@Ru(bpy)32+為電致化學發光信號源，RuSi@Ru(bpy)32+通過共價鍵固載在NPCo/Co3O4-Au表面制得抗體捕獲基底，利用NPCo/Co3O4-Au優良的生物兼容性和大的比表面積將抗體固載在納米復合物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+表面。在本發明中制備的電致化學發光傳感器具有操作簡單，成本低，靈敏度高，特異性高等優點，克服了傳統色譜分析的很多不足。
發明內容
本發明的目的是針對現有的真菌毒素和激素檢測方法存在的問題，提供一種簡單快速可靠的基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+構建的電致化學發光傳感器的制備方法和應用，實現對真菌毒素和激素的靈敏、特異、快速、高效檢測。
本發明的技術方案如下：
1.?一種基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+構建的真菌毒素類和激素類電致化學發光傳感器的制備方法
（1）將直徑4?mm的玻碳電極依次用1.0?μm、0.3?μm、0.05?μm氧化鋁拋光粉拋光處理，乙醇超聲清洗，再用超純水沖洗干凈；
（2）滴涂6?μL、0.5~2?mg?mL-1的待測物抗體孵化物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+/Ab溶液于電極表面，4℃保存至干燥；
（3）滴加4?μL、質量分數為1~3%的牛血清白蛋白溶液，以封閉電極表面的非特異性活性位點，用pH6.4~8.4的PBS溶液沖洗電極表面，4℃晾干，制得一種基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+構建的真菌毒素類和激素類電致化學發光傳感器。
2.?待測物抗體孵化物NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+/Ab溶液的制備
（1）NPCo/Co3O4-Au的制備
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