[發(fā)明專(zhuān)利]一種L-色氨酸的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510295849.0
• 申請(qǐng)日: 2015-06-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104928327B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梅運(yùn)軍;劉軍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 武漢輕工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P13/22
• 分類(lèi)號(hào): C12P13/22
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種L-色氨酸的制備方法，其特征在于包含有以下步驟：a.細(xì)胞破碎工藝段：將發(fā)酵所得菌28-35kg重懸于去離子水中，總體積為400L，向其中加入CTAB破細(xì)胞，CTAB加入量為總體積濃度0.05-0.2％；b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段：向破細(xì)胞后混合液體積中加入1000-1500L去離子水，并向其中加入分離輔助物后進(jìn)行分離，真空抽濾，得到分離液1200-1700L；將分離液在35-40℃真空濃縮至體積為400L；c.酶促轉(zhuǎn)化工藝段：將上述破細(xì)胞混合物泵入轉(zhuǎn)化罐中，加入去離子水至總體積為600L，轉(zhuǎn)化罐中含絲氨酸0.5-1mol/L，吲哚0.5-1mol/L，PLP 0.2-0.4mmol/L，pH值為6.0-9.0，攪拌100-150rpm，溫度35-40℃，時(shí)間為35-50h，達(dá)到酶促反應(yīng)平衡；d.柱分離工藝段：向酶促反應(yīng)平衡液中加入去離子水1000-1200L并上活化后的001×7型陽(yáng)離子柱，上樣完畢后用2mol/L的氨水洗脫，得到含L-色氨酸分離液500-1200L；e.結(jié)晶工藝段：將含L-色氨酸的洗脫液在50-60℃減壓濃縮結(jié)晶得到L-色氨酸；所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為：聚丙烯酰胺、聚合氯化鋁、廢舊717陰離子樹(shù)脂其中的一種物質(zhì)或任意兩種混合物或三種物質(zhì)混合物；所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為：聚丙烯酰胺和廢舊717陰離子樹(shù)脂的混合物；所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為聚丙烯酰胺和廢舊717陰離子樹(shù)脂的混合物的用量為：按反應(yīng)總體積加入0.01-2ppm的聚丙烯酰胺與2％-5％的廢舊717陰離子樹(shù)脂。

2.按照權(quán)利要求1所述的L-色氨酸的制備方法，其特征在于所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為：聚合氯化鋁和廢舊717陰離子樹(shù)脂的混合物。

3.按照權(quán)利要求2所述的L-色氨酸的制備方法，其特征在于所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為聚合氯化鋁和廢舊717陰離子樹(shù)脂的混合物的用量為：按反應(yīng)總體積加入0.01-2ppm的聚合氯化鋁與2％-5％的廢舊717陰離子樹(shù)脂。

4.按照權(quán)利要求1所述的L-色氨酸的制備方法，其特征在于所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為：廢舊717陰離子樹(shù)脂。

5.按照權(quán)利要求4所述的L-色氨酸的制備方法，其特征在于所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為廢舊717陰離子樹(shù)脂的用量為：按反應(yīng)總體積加入2％-5％的廢舊717陰離子樹(shù)脂。

6.按照權(quán)利要求5所述的L-色氨酸的制備方法，其特征在于所述的步驟b.分離細(xì)胞碎片并對(duì)分離液濃縮工藝段中，所述的分離輔助物為廢舊717陰離子樹(shù)脂的用量為：按反應(yīng)總體積加入5％-10％的廢舊717陰離子樹(shù)脂。