[發(fā)明專利]一種青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510295429.2
• 申請日: 2015-06-02
• 公開（公告）號(hào): CN104897887A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周家宏;周林;魏少華;肖夢思;袁秀雪
• 申請（專利權(quán)）人: 南京師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/50
• 分類號(hào): G01N33/50;G01N21/31;G01N21/64
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 韓朝暉

1.一種青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法，其特征在于，采用紫外-可見吸收光譜或熒光光譜分析青蒿素或其衍生物與轉(zhuǎn)鐵蛋白的相互作用，計(jì)算青蒿素或其衍生物與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合常數(shù)K_b，比較青蒿素或其衍生物與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合常數(shù)K_b或根據(jù)結(jié)合常數(shù)K_b進(jìn)行排序，推斷青蒿素或其衍生物抗腫瘤活性的強(qiáng)弱順序，再采用抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述篩選結(jié)果。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟：

1)濃度恒定的轉(zhuǎn)鐵蛋白溶液中，逐漸增大溶液中青蒿素或其衍生物的濃度，掃描其紫外-可見光譜，由下列方程求出結(jié)合常數(shù)k_b

A₀/A-A₀＝ε_Tf/(ε_ART-Tf-ε_Tf)(1+1/k_b[ARTS])

式中：A₀和A分別表示青蒿素或其衍生物不存在和存在時(shí)轉(zhuǎn)鐵蛋白溶液的吸光度；[ARTS]為青蒿素或其衍生物的濃度；ε_Tf和ε_ART-Tf分別表示轉(zhuǎn)鐵蛋白和青蒿素或其衍生物-轉(zhuǎn)鐵蛋白復(fù)合物的吸收系數(shù)；

或者

濃度恒定的轉(zhuǎn)鐵蛋白溶液中，逐漸增大溶液中青蒿素或其衍生物的濃度，以280nm的激發(fā)波長掃描其熒光發(fā)射光譜；由下列方程計(jì)算結(jié)合常數(shù)K_b和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n

log[(F₀-F)/F]＝log?K_b+n?log[Q]

式中：F₀和F分別表示猝滅劑不存在和存在時(shí)轉(zhuǎn)鐵蛋白溶液的熒光強(qiáng)度；[Q]為青蒿素或其衍生物的濃度；

2)比較青蒿素或其衍生物與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合常數(shù)K_b或根據(jù)結(jié)合常數(shù)K_b進(jìn)行排序，推斷青蒿素或其衍生物抗腫瘤活性的強(qiáng)弱順序；

3)采用抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述篩選結(jié)果。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法，其特征在于，所述的青蒿素或其衍生物為青蒿素、雙氫青蒿素、9-OH青蒿素、青蒿素醚類衍生物、酯類衍生物和雜原子取代雙氫青蒿素羥基中氧的衍生物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法，其特征在于，所述的青蒿素醚類衍生物為蒿甲醚或篙乙醚，酯類衍生物為青蒿琥酯、青蒿素碳酸脂或青蒿素羧酸酯，雜原子取代雙氫青蒿素羥基中氧的衍生物為鹵素、氮或硫雜原子取代的雙氫青蒿素衍生物。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的青蒿素及其衍生物抗腫瘤活性的體外篩選方法，其特征在于，所述的方法中，轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度范圍為1.0×10^-6～1×10^-4mol/L；青蒿素或其衍生物濃度范圍為1.0×10^-6～1×10^-3mol/L。