[發明專利]一種快速分析樣品中的糖類化合物的方法

有效

• 申請號: 201510294029.X
• 申請日: 2015-06-01
• 公開（公告）號: CN104833761B
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 劉春勝;崔鶴
• 申請（專利權）人: 華質泰科生物技術（北京）有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司11262
• 代理人: 蘇蕾,鄭霞

技術領域

本申請涉及物質的分析檢測領域，具體涉及一種快速定性和定量分析樣品中的糖類化合物的方法，所述方法采用依次串聯的離子色譜儀、實時直接分析離子源與三級四極桿質譜儀(IC-DART-MS/MS)進行分析檢測。

背景技術

碳水化合物是一類非常重要的物質，通常在食物中以單分子或者與其他大分子物質結合的形式存在，其最主要的功能是在生物體內被代謝而給機體提供能量[1]。諸多食品中均含有單糖或雙糖，食物的質量好壞也與各種糖的含量密切相關，如乳糖含量是牛奶質量的重要指標、麥芽糖含量是飲料質量好壞的指標[2]。血液中葡萄糖的含量高低能表征人體健康狀況，尿液中葡萄糖的含量指示糖尿病人的病情狀況。因此，對糖的準確定性和定量分析是十分重要的研究領域。

目前，常用于分析檢測糖的分析方法有離子色譜法(IC)、高效液相色譜法(HPLC)、電化學法等，其采用的檢測器大多為示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器、紫外檢測器、電化學檢測器等[3-6]。示差折光檢測可以實現初步定性，但是效果較差并且該檢測器靈敏度較差、易受到淋洗液的影響。蒸發光散射檢測器可以較好地避免淋洗液的影響，但選擇性差。鑒于糖類化合物具有較弱的紫外吸收，紫外檢測器不能直接采用，通常需要將糖類化合物衍生化后再使用該檢測器。電化學檢測器應用于糖類的檢測在離子色譜方法中得到廣泛的應用[6,7]，其靈敏度高，線性范圍寬，操作簡便，但是電化學檢測器前處理要求高，在前處理過程中要盡可能除去易于氧化還原的雜質，進而避免干擾。對質譜檢測器而言，該檢測器具有得天獨厚的優勢，不僅靈敏度高，而且能夠能對目標物進行定性與定量分析。但是質譜要求檢測樣品中不能含有非揮發性鹽成分，由于非揮發性的鹽類對ESI電離有較嚴重的離子抑制作用。通常情況下，色譜與質譜聯用(GC-MS/MS和LC-MS/MS)較為廣泛，由于結合了色譜分離使得該分析方法具有較高的分離能力、準確定量和定性等優點。同樣，該方法需要大量的樣本制備，包括液液萃取、固相萃取等，成本高，操作繁瑣耗時[8]。電化學檢測具有快速、高靈敏度的特點，但由于固體電極表面差異性較大，導致電化學檢測的重現性較差。因此建立一種快速、高靈敏、簡單甚至無需樣品前處理的分析方法迫在眉睫。

近年來，離子色譜(Ion Chromatography，IC)在糖的分離方面得到了廣泛的應用，其原理通常是采用NaOH、KOH、Na₂CO₃等水溶液作為流動相，在離子交換色譜柱上，對容易離子化的目標物進行分析的過程。由于IC流動相中常含有非揮發性的Na⁺、K⁺等離子，IC與MS聯用技術受到很大的技術障礙。將IC流動相通過離子色譜抑制器后再接入質譜可除去非揮發性的陽離子，但是操作過程非常繁瑣。

因此，存在對一種快速、準確地定性和定量分析糖類化合物的檢測方法的需求。

所引用的參考文獻：

[1]Mohammad A.Kamal,Peter Klein.Saudi J Biol Sci 2011,18(1):17-21.

[2]Soldatkin,O.O.,et al.Talanta(2013),115:200-207.

[3]A.Cáceres,S.Cárdenas,M.Gallego,A.Rodríguez,M.Valcárcel,Chromatographia 52(2000)314.

[4]W.L.Qian,Z.Khan,D.G.Watson,J.Fearnley,J.Food Comp.Anal.21(1)(2008)78.

[5]J.Kuligowski,G.Quintás,S.Garrigues,M.de la Guardia.Talanta 77(2008)779–785

[6]Kelsey R.Brereton,David B.Green.Talanta 100(2012)384–390

[7]Zuoyi Zhu,Lingling Xi,Qamar Subhani,Zhongping Huang,Yan Zhu.Talanta 113(2013)113–117

[8]Mohammad A.Kamal,Peter Klein.Talanta 115(2013)200–207。

發明內容

本申請的目的是提供一種使用依次串聯的離子色譜儀、實時直接分析離子源與質譜儀對樣品中的糖類化合物比如L-山梨糖進行檢測的方法。