[發明專利]腫瘤特異性和可熱調控的siRNA表達載體及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201510278224.3 | 申請日： | 2015-05-27 |
| 公開（公告）號： | CN104830904B | 公開（公告）日： | 2019-04-02 |
| 發明（設計）人： | 唐麗靈;馮京;廖意;武艷嬌;李麗;孫維超 | 申請（專利權）人： | 重慶大學 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/113;A61K48/00;A61P35/00;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275 | 代理人： | 趙榮之 |
| 地址： | 400044 重*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 腫瘤 特異性 調控 sirna 表達 載體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.腫瘤特異性和可熱調控的siRNA表達載體在構建靶向干擾腫瘤治療基因表達的載體中的應用，其特征在于：所述siRNA表達載體含有由腫瘤特異性啟動子和熱休克元件調控表達的siRNA表達框；所述腫瘤特異性啟動子為人端粒酶逆轉錄酶啟動子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述熱休克元件為HSE（MN）或HSE（XY），所述HSE（MN）的核苷酸序列如SEQID NO.4所示，所述HSE（XY）的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述siRNA表達框的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；其構建方法如下：
a.克隆獲得人端粒酶逆轉錄酶啟動子，然后合成熱休克元件，所述熱休克元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示；
b.將步驟a克隆的人端粒酶逆轉錄酶啟動子和熱休克元件替換pMHSP70psil質粒的HSP70啟動子，所述熱休克元件位于所述人端粒酶逆轉錄酶啟動子5’端；再將SEQ ID NO.8所示序列連入啟動子的3’端，得腫瘤特異性和可熱調控的siRNA表達載體。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：步驟a中，克隆人端粒酶逆轉錄酶啟動子的擴增條件為95℃預變性5min；95℃變性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，30個循環；最后72℃延伸10min，4℃保存。
3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述腫瘤治療基因為SNCG基因。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于重慶大學，未經重慶大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510278224.3/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
