[發明專利]一種高純度土霉素的生產工藝

在審

• 申請號: 201510275046.9
• 申請日: 2015-05-27
• 公開（公告）號: CN104894203A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 任磊
• 申請（專利權）人: 合肥卓元科技服務有限公司
• 主分類號: C12P29/00
• 分類號: C12P29/00;C07C237/26;C07C231/24
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物制藥工藝技術領域，具體是一種高純度土霉素的生產工藝。

背景技術

土霉素又稱為地霉素或氧四環素，英文名稱（TerramycinOxytetracycline)屬于抗菌素的一種，對多種球菌和桿菌有抗菌作用，對立克次體和阿米巴病原蟲也有抑制作用，用來治療上呼吸道感染﹑胃腸道感染﹑斑疹傷寒等，也用于畜禽藥及飼料添加劑。

土霉素是通過生物合成得到的廣譜抗生素，目前國內土霉素提取工藝為用草酸（或磷酸）做酸化劑調節PH值，利用黃血鹽-硫酸鋅作凈化劑協同去除蛋白質等高分子雜質，然后用122樹脂脫色進一步凈化土霉素濾液，最后調PH至4．8左右結晶得到土霉素堿產品。此工藝在生產中一直沿用至今，不思創新。但該工藝所得的土霉素收率低，成品純度亦不足，純度僅有96％～97％。

發明內容

為了解決上述現有土霉素生產工藝的收率低，成品純度不足的缺點，本發明在原有工藝的基礎上加以調節、創新，提供了一種高純度土霉素的生產工藝。

本發明的技術方案如下：一種高純度土霉素的生產工藝，包括以下步驟：

（1）發酵：首先培養三支斜面孢子,?斜面孢子的培養基是由麩皮和瓊脂組成，用純凈水配制，控制培養基內溫度為36.5～36.8℃，相對濕度為50%～60%，培養時間設置為96～108小時；將制得的三支斜面孢子加入無菌水之后制成培養液，將培養液放置于4℃～6℃的冰箱中備用；

準備三個自帶有攪拌裝置和溫度自動調節裝置的發酵罐，分別命名為1號、2號、3號，使用前都采用蒸汽滅菌法滅菌；將上述冰箱中的培養液移入1號發酵罐內，設置罐內溫度為30℃，密封1號發酵罐，發酵28～30小時后，將培養液移入2號發酵罐；

設置2號發酵罐罐內溫度為31℃，密封2號發酵罐，發酵28～30小時后，用pH計測量培養液的pH值，若pH值大于6.0，將培養液移入3號發酵罐；否則繼續培養；

設置3號發酵罐罐內溫度為35℃，密封3號發酵罐，發酵80～100小時后，向罐內通入適量氧氣，向培養液內通入15%質量分數的氨水，同時用pH計測量pH值，當pH值大于6.4后，停止通入氨水；之后每隔10小時重復通入氧氣和氨水的操作；發酵150～160小時后，停止通入氧氣和氨水，然后再發酵15個小時，取出培養液；

（2）酸化：向培養液中緩慢加入65%質量分數的鹽酸作為酸化劑，添加過程中，用pH計監測培養液的pH值，當pH值穩定在1.6～1.9內，停止加入酸化劑；

（3）純化：向培養液中攪拌加入純化劑K2Fe（CN）6－ZnSO4，加入純化劑的容積約等于培養液容積的一半，二者反應后，溶液中出現大量蘭綠色絮狀物；

（4）過濾：將上述產生沉淀的培養液經粗濾器、精濾器、超濾器三重過濾后，抽濾出凈化濾液，用10%質量分數的稀鹽酸調節pH值在4.8左右；

（5）脫色：將上述凈化濾液通入脫色罐，由其中的122-2樹脂進行脫色；

（6）結晶：取出上述脫色后的培養液，加入55%質量分數的氫氧化鈉溶液，調節pH值為4.5～4.8，控制培養液溫度在28～30℃；培養液經離心結晶設備連續結晶，控制結晶速度，使結晶時間控制住2～2.5小時，得到土霉素濕成品；

（7）干燥：將上述土霉素濕成品經過搖擺機過40目的篩網，制成顆粒后進入三級旋風干燥器中，干燥后得到土霉素成品。

所述3號發酵罐中的發酵過程會產生大量泡沫，需加入消沫劑進行消沫。

所述1號發酵罐內發酵完成后，培養液趨于濃厚，并轉黃色，培養液的pH值在6.0～6.4內;?所述2號發酵罐內發酵完成后，培養液的外觀為深粽色，濃稠狀，有少量氣泡產生。

所述發酵過程中的使用三個發酵罐若有條件限制，可以改為使用一個發酵罐，但對應設置三段相同發酵條件的發酵過程。

所述酸化過程中加入的酸化劑可以更改為65%質量分數的草酸或磷酸。

本發明的優點：本發明在原有工藝的基礎上加以調整、創新，提供了一種高純度土霉素的生產工藝。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本發明進行進一步詳細說明。

一種高純度土霉素的生產工藝，包括以下步驟：