[發明專利]一種杜鵑花化學消毒組培方法

有效

• 申請號: 201510274041.4
• 申請日: 2015-05-26
• 公開（公告）號: CN104885942B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發明（設計）人: 郭晉隆;林慶良;許莉萍;高世武;闕友雄
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 福州市眾韜專利代理事務所(普通合伙)35220
• 代理人: 陳智雄,黃秀婷

1.一種杜鵑花化學消毒組培方法，包括培養容器消毒、培養基配制、誘導培養、增殖培養、生根培養和瓶苗移栽，其特征在于：

(1)培養容器消毒：將培養瓶瓶蓋及接種用的不銹鋼盤在100mg/L次氯酸鈉+2mg/L青霉素+100mg/L丙酸鈣的水溶液中浸泡不少于10h，保存備用；

(2)培養基配制：誘導培養基為ER+6～15mg/L?ZT+5～15mg/L?IAA+40～100mg/L次氯酸鈉+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；增殖培養基為：ER+1～3mg/L?ZT+0.5～1.0mg/L?IAA+40～100mg/L次氯酸鈉+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；生根培養基為1/2ER+0.5～1.5mg/LNAA+0.1～0.5IBA?mg/L+40～100mg/L次氯酸鈉+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；所述ER培養基為1965年，Eriksson公開的ER培養基；所述ZT為玉米素；所述NAA為〆-萘乙酸；所述IAA為吲哚乙酸；所述IBA為吲哚丁酸；配制培養基時，先稱各培養基配方中蔗糖和瓊脂粉，加培養基總體積1/2的自來水，加熱至瓊脂粉完全溶解，再按各培養基配方配齊其他原料后，定容、然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl調pH值至5.8，分裝到消毒過的培養容器中，封口，冷卻凝固后備用；

(3)誘導培養：取健壯的杜鵑頂芽或花蕾，先自來水沖洗表面灰塵，剝去外苞片，用體積比為75％酒精中浸2～3s，再用重量比為0.1％HgCl₂消毒6～10min，無菌水沖洗3～5次；在超凈工作臺上，剝去2～3層的苞片，切除基部褐化部分，接種到誘導培養基上，40d后形成若干小芽；培養室溫度為25～28℃，光照12h，光照強度為1200～1500lx；

(4)增殖培養：將誘導培養的小芽轉入增殖培養基中,30d后逐步誘導出叢生芽并發育成不具根的叢生芽苗；將叢生芽苗切成帶芽的莖段，轉接到新的增殖培養基中，每30d轉接一次；培養室溫度為25～28℃，光照12h，光照強度為1200～1500lx；

(5)生根培養：當增殖培養的叢生芽苗長到4～6cm時，將叢生芽苗切成單株，接種到生根培養基上，25d后形成完整植株；培養室溫度為25～28℃，光照12h，光照強度為1200～1500lx；

(6)瓶苗移栽：將生根培養獲得的完整植株取出，洗凈根部的培養基，用800倍的多菌靈浸泡30min后，移栽至栽培基質中，所述栽培基質由泥碳土和珍珠巖組成，其重量比為2∶1；大棚上層用75％遮光網遮蓋，移栽的環境溫度為22～28℃。

2.根據權利要求1所述的一種杜鵑花化學消毒組培方法，其特征在于所述誘導培養基為ER+10mg/L?ZT+10mg/L?IAA+80mg/L次氯酸鈉+3mg/L青霉素+50mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8。

3.根據權利要求1所述的一種杜鵑花化學消毒組培方法，其特征在于所述增殖培養基為：ER+1mg/L?ZT+1.0mg/L?IAA+80mg/L次氯酸鈉+2mg/L青霉素+50mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8。

4.根據權利要求1所述的一種杜鵑花化學消毒組培方法，其特征在于所述生根培養基為1/2ER+1.0mg/L?NAA+0.5IBA?mg/L+80mg/L次氯酸鈉+2mg/L青霉素+80mg/L丙酸鈣+20g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8。