[發明專利]用索氏提取器提取樹參葉活性成份的方法

在審

• 申請號: 201510252812.X
• 申請日: 2015-05-19
• 公開（公告）號: CN104857044A
• 公開（公告）日: 2015-08-26
• 發明（設計）人: 王強
• 申請（專利權）人: 浙江大學寧波理工學院
• 主分類號: A61K36/25
• 分類號: A61K36/25;A61P29/00;A61P19/02;A61P25/00;A61P25/06;A61P17/02;A61P15/00;A61P37/04
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術領域

本發明涉及植物提取，具體涉及用索氏提取器提取樹參葉活性成份的方法。

背景技術

樹參(Dendropanax?dentiger(Harms)?Merr)為五加科(Araliaceae)樹參屬(Dendropanax)植物，常綠闊葉林或灌叢，分布于我國長江以南各省區，在海拔幾十米至1800米都能生長，原料易得，資源豐富，有著悠久的民間藥用歷史。《中華本草》記載：樹參具有舒筋活絡，壯筋骨、祛風除濕、活血等功效，常用于風濕性及類風濕性關節炎、臂叢神經炎、癱瘓、偏頭痛、扭傷、癰癤、月經不調、麻痹后遺癥等疾病的治療。但目前國內外學者還未有對樹參葉提取物及其活性成份的藥理活性研究的報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種用索氏提取器提取樹參葉活性成份的方法，提取方法簡單，提取效率較高，提取的活性成份具有提高兔的免疫力。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：用索氏提取器提取樹參葉活性成份的方法，其步驟如下：

a、將樹參當年生的鮮樹參葉風干后粉碎，過45～60目篩，得到樹參葉粉末；

b、將1Kg樹參葉粉末裝入索氏提取器中，用質量百分濃度70～80%的乙醇水溶液20～40?L回流提取4～6h，過濾，得到樹參葉提取液；

c、將樹參葉提取液在壓力為450～500Pa的條件下，減壓濃縮55～70min得濃縮液，濃縮液中加入與濃縮液等體積的石油醚，萃取30～45min，過濾，石油醚萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的乙酸乙酯，萃取30～45min，過濾，乙酸乙酯萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的正丁醇，萃取30～45min，過濾，正丁醇萃取的濾液在450～500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105℃下干燥24h，得到黃色的樹參葉活性成份。該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為623.5?mg。

與現有技術相比，本發明的優點在于用索氏提取器提取樹參葉活性成份的方法，用乙醇水溶液為溶劑，在索氏提取器中回流提取，再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，得到黃色的樹參葉活性成份，該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，每公斤樹參葉粉末可以提取樹參葉活性成份25g左右，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為623.5mg，本發明的提取方法簡單，提取效率較高，提取的活性成份具有提高兔的免疫力。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步詳細描述。

實施例1

將樹參當年生的鮮樹參葉，風干后粉碎，過45～60目篩，得到樹參葉粉末；將1Kg樹參葉粉末裝入索氏提取器中，用質量百分濃度70～80%的乙醇水溶液20～40?L回流提取4～6h，過濾，得到樹參葉提取液；將樹參葉提取液在壓力為450～500Pa的條件下，減壓濃縮55-70min，得濃縮液，在濃縮液加入與濃縮液等體積的石油醚萃取30～45min，過濾，濾液中加入與濃縮液等體積的乙酸乙酯萃取30～45min，過濾，濾液中加入與濃縮液等體積的正丁醇萃取30～45min，過濾，濾液在450～500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105℃下干燥24h，得到黃色的樹參葉活性成份25g左右；石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三級極性梯度萃取，且正丁醇萃取的主要成分為皂甙。因此該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，用香草醛-冰乙酸-高氯酸顯色法測定，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為623.5mg，該提取物中皂甙主要成分為：β-胡蘿卜苷、芥子醛葡萄糖苷、丁香苷、杜仲樹脂醇雙吡喃葡萄糖苷、丁香樹脂醇雙吡喃葡萄糖苷和丁香酚-蕓香糖苷。

實施例2

1月齡試驗兔分2組，每組50只兔子，分別為試驗組和空白組，將實施例1的樹參葉活性成份用水配制成質量百分濃度0.1%口服液，試驗組用口服液喂養15日，每天一次，每次10mL，空白組用等量的清水喂養，喂養結束，隔一天取兔血清測定血清總蛋白、抗體水平、白蛋白、球蛋白和血清免疫球蛋白IgG、IgM濃度水平，試驗組血清總蛋白66.01?g/l、抗體水平175.32?pg/ml、白蛋白33.50?g/l、球蛋白32.76?g/l、IgG4.284?g/l、IgM0.2430g/l，空白組血清總蛋白62.79?g/l、抗體水平170.21?pg/ml、白蛋白38.26?g/l、球蛋白30.15?g/l、IgG3.928?g/l、IgM0.2337g/l，其中血清總蛋白、抗體水平、球蛋白、IgG濃度水平極顯著高于對照，IgM濃度水平高于對照，白蛋白濃度水平顯著低于對照。