[發明專利]一種瓊脂糖酶的固定化方法在審
| 申請號: | 201510251158.0 | 申請日: | 2015-05-14 |
| 公開(公告)號: | CN105349518A | 公開(公告)日: | 2016-02-24 |
| 發明(設計)人: | 李曉梅 | 申請(專利權)人: | 菏澤家政職業學院 |
| 主分類號: | C12N11/10 | 分類號: | C12N11/10;C12N11/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 274300 山東省菏澤市單*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 瓊脂 固定 方法 | ||
1.瓊脂糖酶固定化的方法,其特征在于用殼聚糖微球固定化瓊脂糖酶。包括以下過程:
步驟(一):用1.5-2%(V/V)乙酸配制1∶20(W/V)的殼聚糖溶液,充分溶解;
步驟(二):將步驟(一)的殼聚糖溶液逐滴滴入1mol/L氫氧化鈉溶液中,殼聚糖將凝聚成白色顆粒,過濾收集殼聚糖珠;
步驟(三):將步驟(二)的殼聚糖珠用蒸餾水洗滌至中性;
步驟(四):將步驟(三)的殼聚糖珠用0.2mol/L、pH7.6的磷酸緩沖溶液浸泡過夜;
步驟(五):取步驟(四)中的殼聚糖珠載體2.5-5g,加入2.5%的戊二醛20-25ml,水浴振蕩0.5小時,室溫交聯5-6小時,磷酸緩沖液沖洗殼聚糖珠交聯載體;
步驟(六):在步驟(五)中的殼聚糖珠交聯載體中加入10-15mL稀釋的瓊脂糖酶液,攪拌均勻,4℃固定2-3小時,用磷酸緩沖液沖洗;
步驟(七):將步驟(六)中的固定化酶抽真空得到固定化瓊脂糖酶。
2.根據本發明所述的制備固定化瓊脂糖酶的載體是殼聚糖。
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