[發明專利]一種基于多肽K12的轉基因載體及其應用

有效

• 申請號: 201510248910.6
• 申請日: 2015-05-15
• 公開（公告）號: CN104830903B
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發明（設計）人: 劉克海;胡靜;張亞光;周雪非;毛媛;韓娟娟
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C07K7/08;C12N15/11;A61K48/00;A61K38/10;A61P35/00
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙)31262
• 代理人: 金重慶

1.一種基因載體，其特征在于，它是由多肽和聚乙烯亞胺衍生物偶聯而成，所述的聚乙烯亞胺衍生物是泊洛沙姆407修飾的聚乙烯亞胺即P407-聚乙烯亞胺，所述的泊洛沙姆407與聚乙烯亞胺的摩爾比為1:10；所述的聚乙烯亞胺的分子量為2KDa，所述多肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的多肽與聚乙烯亞胺衍生物的摩爾比為2:1。

2.權利要求1所述的基因載體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(a)合成如權利要求1所述的多肽；

(b)泊洛沙姆407除水后，加入兩倍摩爾量的三光氣，磁力攪拌反應后加入N-羥基琥珀酰亞胺，攪拌條件下逐滴加入無水三乙胺，待反應完全后除去溶劑，所得殘渣溶于乙酸乙酯，離心取上清液，旋蒸除去乙酸乙酯，冷卻固化后得活化的泊洛沙姆407；

(c)活化的泊洛沙姆407與聚乙烯亞胺PEI分別溶于無水二氯甲烷，將所得的兩液同時加入無水二氯甲烷底液中，充氮氣飽和后磁力攪拌過夜，透析，凍干，得P407-PEI；

(d)將表面活性劑溶解于二甲基亞砜溶液中，步驟(a)所制備的多肽和步驟(c)所制備的P407-PEI分別溶解于PBS溶液，將表面活性劑溶液加入到P407-PEI液中得到馬來酰亞胺化的P407-PEI液，將制備好的多肽溶液加入到馬來酰亞胺化的P407-PEI液中，4℃搖動反應過夜，離心凍干，即得。

3.權利要求1所述的基因載體與DNA形成的復合物。

4.根據權利要求3所述的復合物，其特征在于，所述的DNA含報告基因、抗癌基因和/或細胞因子基因。

5.權利要求1所述的基因載體在制備基因治療的藥物中的應用。