[發(fā)明專利]利用分子組裝增溶技術(shù)制備酵母β?D?葡聚糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510245370.6
• 申請(qǐng)日: 2015-05-14
• 公開（公告）號(hào): CN104910292B
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王強(qiáng);劉紅芝;劉麗;石愛民;胡暉;李亞楠;林偉靜;段玉權(quán);高潔;劉曉永
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號(hào): C08B37/02
• 分類號(hào): C08B37/02;C12N1/06
• 代理公司: 北京泛華偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11280
• 代理人: 李渤,郭廣迅

1.一種利用分子組裝增溶技術(shù)制備酵母β-D-葡聚糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)對(duì)酵母細(xì)胞壁的酶解液進(jìn)行在70～200MPa下的微射流處理，然后離心得到沉淀；

(2)將步驟(1)得到的沉淀用離子液體重懸后進(jìn)行分散處理得到溶液；其中，所述離子液體為1-乙基-3-甲基咪唑醋酸鹽或1-烯丙基-3-甲基咪唑氯鹽；

(3)將步驟(2)得到的溶液離心后加入乙醇，離心收集沉淀；

(4)將步驟(3)得到的沉淀以水重懸，然后離心取上清液。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述酵母細(xì)胞壁的酶解液是通過包括如下步驟的方法制備的：

a.將酵母細(xì)胞壁與水混合得到懸浮液，然后離心收集沉淀；

b.將步驟a得到的沉淀以水重懸，加熱浸提，然后離心收集沉淀；

c.將步驟b得到的沉淀用水重懸，加入蝸牛酶或中性蛋白酶酶解得到酶解液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟a、b、c中的水為去離子水。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟a中，所述酵母細(xì)胞與水的質(zhì)量比為1：5～7。

5.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟a中，所述離心是以4000～5000rpm的轉(zhuǎn)速離心5～10min。

6.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟b中，所述加熱浸提的溫度為80℃～95℃。

7.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟b中，所述沉淀與水的質(zhì)量比為15％～25％。

8.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟b中，所述離心是以4000～5000rpm的轉(zhuǎn)速離心5～10min。

9.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟c中，所述沉淀與水的質(zhì)量比為1：3～20。

10.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在所述方法的步驟c中，所述酶解的酶添加質(zhì)量為所述沉淀的質(zhì)量的0.01％～0.05％，所述酶解的溫度為30～45℃，酶解時(shí)間為0.5～1.0小時(shí)。

11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟 (1)中，所述微射流處理重復(fù)3～10次。

12.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(2)中，將步驟(1)得到的沉淀用離子液體重懸并充分?jǐn)嚢杈鶆蚝筮M(jìn)行分散處理得到溶液。

13.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(2)中，將步驟(1)得到的沉淀用離子液體重懸并充分?jǐn)嚢杈鶆蚝筮M(jìn)行分散處理得到溶液，在所述溶液中，以g：ml計(jì)所述沉淀與離子液體的比例為0.5％～2.0％。

14.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(2)中，所述分散處理是以8000～10000rpm的轉(zhuǎn)速分散處理5～8min。

15.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(3)中，所述乙醇的體積為所述溶液體積的2～4倍。

16.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)還包括以乙醇將沉淀洗滌2～3次以脫除沉淀中殘留的離子液體。

17.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(4)中，將步驟(3)得到的沉淀以水重懸并充分?jǐn)嚢杈鶆颍缓箅x心取上清液。

18.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(4)中，將步驟(3)得到的沉淀以水重懸并充分?jǐn)嚢杈鶆颍缓箅x心取上清液；其中以g：ml計(jì)所述沉淀與水的比例為1：200～500。

19.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述制備方法的步驟(4)中，所述離心是以4500rpm的轉(zhuǎn)速離心20min。