[發明專利]高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法

有效

• 申請號: 201510243042.2
• 申請日: 2015-05-12
• 公開（公告）號: CN104807918A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 陳學松;郭振旺;黃蘅;吳嵐;鄧水德;黎志銳
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為;蔡國

1.一種高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：樣品預處理；收集豬尿，首先加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進行酶解，酶解結束后加入三氯乙酸沉淀豬尿中的蛋白質，加入4倍豬尿體積的Ph范圍為8.0～10.0的氨水-氯化銨緩沖液，漩渦混合器混合后離心；取離心后的上清液；

步驟2：將上清液加入到SLE柱后，靜置2～4分鐘；

步驟3：采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺的洗脫液；

步驟4：采用高效液相色譜法對步驟3得到的洗脫液進行檢測，同時采用不同濃度的萊克多巴胺標準溶液繪制標準回歸曲線，所述的高效液相色譜法的具體參數為：

色譜柱：C18柱，150mm*3.9mmID

柱溫：室溫

流動相：水和乙腈的混合液，其中水和乙腈的體積比為100:12；

檢測器：UV檢測器；

檢測波長：226nm；

進樣量：50μL；

其中，所述的二元洗脫劑為異丙醇和乙酸甲酯的混合物，其中異丙醇和乙酸甲酯的重量比為0.5～1:1。

2.根據權利要求1所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，所述的豬尿為1ml，緩沖溶液為4ml，步驟2中所取的上清液為0.5ml，所述的步驟3中，每次洗脫時所用的洗脫劑為0.5ml。

3.根據權利要求2所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，每毫升的尿液中加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶12μL。

4.根據權利要求2所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，所述的三氯乙酸和豬尿的質量比為1:98～100。

5.根據權利要求1所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，所述的步驟1中，漩渦混合器混合處理的時間為0.5～1.5分鐘。

6.根據權利要求5所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，所述的步驟1中，所述的離心處理的具體操作為：將經混合處理的溶液在離心機中以9000～11000轉/分鐘的速度離心0.5～1.5分鐘。

7.根據權利要求1至6任一所述的高精度測量豬尿中的萊克多巴胺含量的方法，其特征在于，所述的SLE柱為奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱。