[發明專利]三氯殺螨醇農殘檢測中成品茶葉樣品的前處理方法

有效

• 申請號: 201510241551.1
• 申請日: 2015-05-13
• 公開（公告）號: CN104819884B
• 公開（公告）日: 2017-07-14
• 發明（設計）人: 譚君;文洋;劉仲華
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司43113
• 代理人: 何為,袁穎華

技術領域

本發明涉及農殘檢測領域，尤其涉及一種成品茶葉中農殘檢測之前的樣品前處理方法，具體涉及一種快捷、高效、經濟、環保的樣品前處理方法，可應用于各類成品茶葉中的三氯殺螨醇農殘分析。

背景技術

目前就茶葉農殘限量，世界上已有18個國家和組織頒發了349項農藥允許殘留標準，并且一些茶葉主要進口國還對茶葉中的農藥殘留量制定了更為嚴格的限量法規，使我國茶葉出口面臨巨大壓力。在加大對我國茶葉進口的檢查力度的同時，每年都制定了更為嚴格的農藥最高殘留限量標準（MRL）、擴大茶葉檢驗項目，以及出臺技術法規、標準和合格評定程序，實施貿易技術壁壘，使我國茶葉出口貿易遭受最高的技術性壁壘。

我國的國家標準、行業標準、地方標準等各類方法與限量的標準都是以成品茶葉，即干茶，作為對象而制定的。由于成品茶葉經過制茶加工的復雜工序后，產生了大量的特有化學成分，如茶黃素、茶紅素、茶褐素等等色素類物質；還有大量的茶多酚、咖啡堿、茶堿、茶氨酸、茶多糖等等特殊功效物質，并且這些物質隨著茶鮮葉的干燥失水而濃縮富集，故成品茶葉中有94%以上的物質組成為種類繁多的干擾物質（干燥后的水分一般控制在6%以下）。在進行農殘檢測過程中，上述大量的茶葉中化學成分就會作為共存雜質而造成嚴重的響應干擾，即“基質效應”，影響測定結果的準確性，甚至可能是假陽性結果。在國標GB/T 23204-2008中推薦的固相萃取小柱并非普通的SPE柱，而是TPT型號的茶葉專用柱，由此可見一斑。因此在茶葉的農殘檢測過程中，較一般的蔬菜水果而言，需要進行更為嚴格的樣品前處理操作，在有效脫去大量干擾物質的同時富集“痕量”甚至是“超痕量”的殘留農藥，以便準確測定和分析。

農藥殘留分析的全過程可以分為樣本采集、制備、貯藏、提取、凈化、濃縮和測定等步驟及對殘留農藥的確證，而農殘檢測方法主要包括：提取、凈化、濃縮、測定四個步驟，其中提取和凈化是目前樣品前處理的主要技術核心。目前針對茶葉樣品，國內外常用的前處理技術主要有：固相萃取技術（SPE）、固相微萃取技術（SPME）、超臨界流體萃取技術（SFE）、基質固相分散技術（MSPD）、凝膠滲透色譜技術（GPC）、快速溶劑萃取（ASE）等等。如現行國家標準方法GB/T 23205-2008、GB/T 23204-2008、GB/T 23376-2009、GB/T 23379-2009等；我國出入境檢驗檢疫行業標準SN/T 1117-2008、SN/T 1724-2009、SN/T 1747-2006、SN/T 1950-2007、SN/T 1591-2005、SN/T 0711-2011等；我國農業行業標準NY/T 1724-2009等等。

但成品茶葉樣品的上述現有前處理方法存在如下缺陷：

1.復雜耗時。整個的樣品前處理步驟包括2-3次的溶劑提取、濃縮上樣、凈化洗脫、濃縮、定容、檢測，從樣品粉碎開始到儀器開始檢測結束，全過程的周期耗時在4小時以上，步驟繁瑣，工作量大，不能快速地給出準確的結果。

2.成本高。其中很多技術都需要專門的設備和耗材，如SPE技術需要專門的SPE小柱，現市場價格在每支十幾到幾十元不等（填料類型和質量決定價格），如GB/T 23204-2008國標方法中使用的Cleanert TPT一般售價在100元/支左右；且這種SPE小柱為一次性耗材，不能重復使用；此外，該還需要配套的固相萃取裝置和加壓泵進行加壓控速，一般最低售價在3000元/套以上，故一份樣品的實際消耗成本就在100元以上。

3.前處理過程中有毒有害的有機溶劑消耗較多（80-120毫升），造成環境污染并威脅人員健康。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：針對上述現有技術的不足，提供一種操作簡便、效果良好、溶劑消耗量小、分析成本低的綠色環保的三氯殺螨醇農殘檢測中成品茶葉樣品的前處理方法。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：一種三氯殺螨醇農殘檢測中成品茶葉樣品的前處理方法，該方法是取粉碎的干燥成品茶葉樣品，按1g成品茶樣品加2-5ml水的比例，加水浸潤后，再加入為成品茶葉樣品重量1-2倍的三氯殺螨醇分子印跡聚合物，研磨，混勻，裝入預填有該三氯殺螨醇分子印跡聚合物的層析柱，先以去離子水洗滌，再以體積比為95:5的乙腈和冰醋酸混合溶劑為洗脫劑進行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液于30-50℃下濃縮干燥，以正己烷溶解定容；其中，上述去離子水的用量為每1克成品茶葉樣品用20-30ml的去離子水，乙腈和冰醋酸混合溶劑的用量為每1克成品茶葉樣品用30-40ml的混合溶劑。