[發明專利]一種麻附甘制劑的鑒別方法

有效

• 申請號: 201510241362.4
• 申請日: 2015-05-13
• 公開（公告）號: CN104792911B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: 劉金磊;石紅艷;李詩標;張為勝;劉圣梅
• 申請（專利權）人: 濟南康眾醫藥科技開發有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/50;G01N30/90
• 代理公司: 暫無信息
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1.一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：用高效液相色譜法鑒別附子，其色譜柱以極性乙醚連接苯基鍵合硅膠為填充劑。

2.根據權利要求1的一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：系統適用性試驗，流動相以乙腈：0.05%-0.2%的磷酸溶液比例為18：82至25：75，其中磷酸溶液含有0.02%-0.06%三乙胺和0.01%-0.03%二正丁胺，檢測波長為222-242nm，理論板數按苯甲酰新烏頭原堿峰計算應不低于6000；

對照品溶液的制備：取苯甲酰新烏頭原堿對照品、苯甲酰烏頭原堿對照品、苯甲酰次烏頭原堿對照品適量，精密稱定，加乙腈制成每1ml分別含20-70μg、5-20μg、5-20μg的混合溶液，作為對照品貯備液，精密量取對照品儲備液用0.05%-0.2%磷酸溶液稀釋2-10倍，搖勻作為對照品溶液；

固相萃取柱系統適用性試驗：精密量取對照品貯備液5ml，室溫減壓回收至干，精密加入0.1mol/L鹽酸50ml使溶解，精密量取10ml，加在固相萃取柱上，以混合型陽離子交換反相吸附劑為填充劑，150-200mg，容量為4-10ml，預先依次用乙腈、水各6ml洗脫，依次以水3ml、1.25%氨溶液、水、甲醇、乙腈各5ml洗脫，待洗脫液流盡后，放置5分鐘，繼用乙腈-濃氨試液=90：10的混合溶液10ml洗脫，收集洗脫液，于40℃以下減壓回收溶劑至干，殘渣精密加入乙腈-0.1%的磷酸溶液=20：80的混合溶液5ml使溶解，濾過，取續濾液作為固相萃取柱系統適用性試驗溶液；

分別精密吸取上述系統適用性試驗溶液與對照品溶液各10-30μl，注入液相色譜儀，測定，計算系統適用性試驗溶液與對照品溶液中各相應成分峰面積的比值，不得小于0.95；

供試品溶液的制備：取檢品，稱取0.2-2g，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1mol/L鹽酸溶液25ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-50分鐘并時時振搖，放冷，再稱定重量，用0.1mol/L鹽酸溶液補足減失的重量，搖勻，以每分鐘2000-6000轉離心10-40分鐘，濾過，精密量取續濾液10ml，照固相萃取柱系統適用性試驗項下的方法，自“加在固相萃取柱上”起，依法操作，制備供試品溶液；

鑒別：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10-30μl，注入液相色譜儀測定，供試品色譜中呈現與苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿和苯甲酰次烏頭原堿對照品色譜峰保留時間相對應的色譜峰，即確定制劑中含有附子，否則制劑中不含附子。

3.根據權利要求2的一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：理論板數按苯甲酰新烏頭原堿峰計算應不低于6000。

4.根據權利要求2的一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：制備供試品溶液時取樣量是0.5-1g。

5.根據權利要求2的一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：所用固相萃取柱填料為混合型陽離子交換反相吸附劑，規格為100-200mg，容積為5-10ml，并預先依次用乙腈、水各6ml洗脫處理。

6.根據權利要求2的一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：供試品溶液的制備過程中，固相萃取柱的洗脫過程依次為水3ml，1.25%氨溶液、水、甲醇、乙腈各5ml，待洗脫液流盡后，放置5分鐘，再用乙腈：濃氨試液=90：10的混合溶液10ml洗脫，收集洗脫液。

7.一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：用薄層色譜法鑒別麻黃：取檢品，稱取0.5-5g，加濃氨試液3-10滴，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml充分振搖，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5-2mg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷：甲醇：濃氨試液=20：5：0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的紅色斑點，即確定是含有麻黃的制劑。

8.一種麻附甘藥物的鑒別方法，其特征在于：用薄層色譜法鑒別甘草：取檢品，稱取0.5-3g，加乙醚40ml，加熱回流1小時，濾過，棄去醚液，藥渣加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5-1.5g，同法制成對照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各3-10μl，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以正丁醇：濃氨試液：乙醇=5：2：1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，即確定是含有甘草的制劑。