[發明專利]一種抑制肺癌細胞轉移的藥物組合物以及檢測方法

有效

• 申請號: 201510240011.1
• 申請日: 2015-05-13
• 公開（公告）號: CN104873513B
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 燕啟江
• 申請（專利權）人: 太原金域臨床檢驗有限公司
• 主分類號: A61K31/513
• 分類號: A61K31/513;A61P35/04;G01N21/84;A61K31/357;A61K31/4745
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙)11470
• 代理人: 劉曄

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及一種抑制肺癌細胞轉移的藥物組合物以及肺癌細胞轉移的檢測方法。

背景技術

肺癌是一種常見的肺部惡性腫瘤，近年來的發病率和死亡率增長最快，對人類健康安全的威脅也越來越大。惡性腫瘤是危害人類生命健康的細胞性疾病，腫瘤細胞從生物體內正常細胞轉化為惡性細胞，其形態、功能、代謝和增殖等都會發生變化，可以看作是細胞的異常分化導致其具有永生性。

水飛薊賓(Silybin)是從菊科藥用植物水飛薊種子的種皮中提取所得的一種天然黃酮木脂素類化合物。水飛薊賓呈黃色粉末，味苦，可溶于丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇，微溶于氯仿，幾乎不溶于水。其分子式為C₂₅H₂₂O₁₀，摩爾質量為482.12。水飛薊賓臨床上主要用于治療中毒性及酒精相關性肝病的治療，還可作為抗氧化食品添加劑。藥理學研究表明，水飛薊賓能夠清除機體內自由基，延緩衰老，對抗脂質過氧化，抑制一氧化氮的產生，減輕對組織細胞的毒素，保護肝細胞膜、改善肝功能，降血脂和保護心肌等作用。孫羿等在《水飛薊賓對人膀胱癌細胞株5637增殖的抑制作用及其機制》一文中指出水飛薊賓可抑制人膀胱癌細胞株5637的增殖，并能降低凋亡抑制因子Survivin的mRNA表達。中國專利申請201010238453.X公開了水飛薊賓在治療神經受損方面的用途。

替加氟是氟尿嘧啶的衍生物，在體內經肝臟活化轉變為氟尿嘧啶而起抗腫瘤作用，能干擾和阻斷DNA、RNA及蛋白質合成，主要作用于S期，是抗嘧啶類的細胞周期特異性藥物。藥理學研究表明，替加氟對胃癌、結腸癌、直腸癌、胰腺癌、乳腺癌和肝癌具有一定的療效。

喜樹堿類藥物通過特異性抑制DNA拓撲異構酶I，產生DNA斷裂，使腫瘤細胞死亡。喜樹堿類藥物具有較寬的抗瘤譜，主要用于胃癌、腸癌和肝癌等的治療。

目前，市場上仍缺少可以顯著抑制肺癌細胞轉移的藥物組合物。

發明內容

為解決現有技術中存在的問題，本發明提供一種抑制肺癌細胞轉移的藥物組合物，并提供了相應的肺癌細胞轉移的檢測方法。

一種抑制肺癌細胞轉移的藥物組合物，包括水飛薊賓、替加氟和喜樹堿類藥物；所述肺癌細胞選自非小細胞肺癌細胞株A549。

發明人對現有的具有抗癌效果的藥物進行了大量篩選和復配，預料不到地發現：通過水飛薊賓、替加氟和喜樹堿類藥物以一定重量比組合得到的藥物組合物具有良好的肺癌細胞抑制效果，且可顯著抑制肺癌細胞的轉移。

通常情況下，水飛薊賓主要用于肝臟疾病的治療，替加氟主要用于治療消化系癌。喜樹堿類藥物雖然具有較廣泛的抗癌作用，但尚無文獻報道喜樹堿類藥物可與水飛薊賓、替加氟聯合作為組合物聯合使用。替加氟即1-(四氫-2-呋喃基)-5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮。

優選地，所述藥物組合物中，水飛薊賓、替加氟和喜樹堿類藥物的質量比為(1~2)：(1~2)：(0.5~1)。

優選地，所述藥物組合物中，水飛薊賓、替加氟和喜樹堿類藥物的質量比為2：2：1。

優選地，所述喜樹堿類藥物選自喜樹堿、羥基喜樹堿或硝基喜樹堿。

優選地，所述藥物組合物由水飛薊賓、替加氟、喜樹堿類藥物和藥學上可接受的載體制得。

優選地，所述藥物組合物為注射劑。

相應地，本發明還提供一種肺癌細胞轉移的檢測方法，包括如下步驟：A）培養肺癌細胞，所述肺癌細胞選自非小細胞肺癌細胞株A549，采用所述的藥物組合物對所述肺癌細胞進行處理；B）采用胰酶消化所述肺癌細胞，并用不含胎牛血清的基礎培養基重懸細胞；C）進行細胞計數后，對細胞懸液進行稀釋；D）將細胞懸液加入至Transwell小室，并加入含胎牛血清的培養基至Transwell小室下方的培養孔里，于培養箱中進行培養后，用甲紫染色，顯微鏡下檢測所述肺癌細胞的轉移。

根據Corning公司的Transwell說明書中的介紹，可以認為Transwel是一種膜濾器，也可認為是一種有通透性的支架。將Transwell小室放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上室內盛裝上層培養液，下室內盛裝下層培養液，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。發明人將細胞種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

優選地，所述培養箱的培養條件包括37℃和5%的二氧化碳。