[發明專利]圓果種黃麻種子提取物的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201510230874.0
• 申請日: 2015-05-07
• 公開（公告）號: CN104887724B
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: 朱云國;程舟;李珊;楊曉伶;李德芳;陳安國
• 申請（專利權）人: 同濟大學;中國農業科學院麻類研究所
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61K131/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 陳亮

本發明涉及圓果種黃麻種子提取物的制備方法及應用，將圓果種黃麻種子粉碎，加入其5倍重量的石油醚在室溫條件下浸提脫脂；脫脂完成后，利用5?10倍重量的乙醇水溶液對圓果種黃麻種子進行回流提取1～3次，每次1～3h，收集所得到的浸膏，即為圓果種黃麻種子的乙醇提取物，于?20℃保存，該提取物應用于對人膀胱癌細胞增殖的抑制。與現有技術相比，本發明對人膀胱癌細胞株T24的生長抑制更高效，且對正常膀胱上皮細胞影響小，對膀胱癌治療、我國黃麻種質資源的綜合利用及增加麻農收入均具有重要意義。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，尤其是涉及一種圓果種黃麻種子提取物的制備方法及應用。

背景技術

膀胱癌(Bladder Cancer)是泌尿系統最常見的惡性腫瘤，發病率居世界惡性腫瘤第九位、居我國泌尿系統惡性腫瘤第一位。雖然70-80％的初發膀胱癌為非浸潤性(也稱為表淺性)，但術后易復發，其復發率高達70％，并有約15％的患者發展為浸潤性膀胱癌。目前臨床上主要采用經尿道膀胱腫瘤切除術(TUR-BT)后定期膀胱灌注絲裂霉素(MMC)等化療藥物來預防非浸潤性膀胱癌的復發與進展，但存在有效率低(僅為30-50％)和毒副作用大等問題。因此，迫切需要開發新的高效低毒的抗膀胱癌藥物來提高膀胱癌的化療效果并降低毒副作用。

從植物中提取的紫杉醇、喜樹堿、長春新堿等抗癌藥物由于作用機制獨特、抗癌療效顯著已成為許多癌癥治療的首選藥，約占抗癌藥30％的市場份額。因此從植物資源中尋找新型抗癌藥或先導化合物，已成為當今癌癥治療研究領域的熱點之一。從有毒植物中尋找抗癌新藥被視為一條捷徑。

圓果種黃麻(Corchorus capsularis)屬椴樹科黃麻屬韌皮纖維作物，為一年生草本植物，別名火麻、綠麻、絡麻、水絡麻、野洋麻、圓果黃麻、圓蒴黃麻、苦麻葉、牛泥茨、三珠草、天紫蘇和麻骨頭等。圓果種黃麻原產亞洲熱帶，中國長江以南廣泛栽培，其韌皮纖維具有吸濕性能好、散失水分快等特點，主要用于紡織麻袋、粗麻布等。圓果種黃麻種子有毒，在民間有被作為治療腹瀉痢疾和瘡癤腫毒，具有清熱解暑、拔毒消腫的功效。

經文獻檢索，迄今尚未見有圓果種黃麻種子提取物用于抑制膀胱癌細胞增殖及其相關疾病方面的報道。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種療效更好、且對正常膀胱上皮細胞影響小的圓果種黃麻種子提取物的制備方法及應用。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

圓果種黃麻種子提取物的制備方法，采用以下步驟：

(1)將圓果種黃麻種子粉碎，加入其5倍重量的石油醚在室溫條件下浸提脫脂；

(2)脫脂完成后，利用5-10倍重量的乙醇水溶液對圓果種黃麻種子進行回流提取1～3次，每次1～3h，收集所得到的浸膏，即為圓果種黃麻種子的乙醇提取物，于-20℃保存。

粉碎后的圓果種黃麻種子在石油醚中浸提脫脂48h。

利用乙醇水溶液在室溫下密閉浸泡脫脂后的圓果種黃麻種子2h，然后水浴加熱至回流溫度進行回流，過濾后用旋轉蒸發儀濃縮獲得浸膏。

所述的乙醇水溶液的體積分數為60-90％。

所述的圓果種黃麻種子為野生或栽培圓果種黃麻種子。

制備得到圓果種黃麻種子提取物可以應用于對人膀胱癌細胞增殖的抑制，采用以下步驟：

(1)處于對數生長期的細胞：將人膀胱癌細胞T24以每孔10000個細胞濃度接種于96孔板中；

(2)過夜貼壁后，以0.1、0.5、1、5和10ug/ml濃度的圓果種黃麻種子乙醇提取物給藥，并以5、10、50和100ug/ml絲裂霉素為陽性對照，每個處理設6個重復孔，重復實驗3次；