[發(fā)明專(zhuān)利]一種腸桿菌屬菌株CV?v降解孔雀石綠的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510230793.0
• 申請(qǐng)日: 2015-05-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104830729B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 都林娜;李剛;許方程;王陽(yáng);陳文華;泮琇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 溫州科技職業(yè)學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 重慶為信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)50216
• 代理人: 余錦曦

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于污水中染料降解技術(shù)領(lǐng)域，具體的說(shuō)，涉及一種腸桿菌屬菌株CV-v降解孔雀石綠的方法。

背景技術(shù)

孔雀石綠(Malachite Green,MG)，是一種極易溶于水的三苯甲烷類(lèi)染料，可廣泛應(yīng)用于印染、食品加工、醫(yī)藥、水產(chǎn)養(yǎng)殖和工業(yè)等各個(gè)領(lǐng)域中，尤其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，孔雀石綠可作為驅(qū)蟲(chóng)劑、殺蟲(chóng)劑、防腐劑廣泛用于預(yù)防與治療水霉病、鰓霉病和小瓜蟲(chóng)病等。但其廣泛使用造成的負(fù)面效應(yīng)，如對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞、水生生物和其他有機(jī)生命體的致癌致畸效應(yīng)，也凸現(xiàn)出來(lái)，引起了科學(xué)界的廣泛關(guān)注。因此，美國(guó)、日本、英國(guó)等許多國(guó)家和地區(qū)，立法嚴(yán)禁使用孔雀石綠，且該染料已被美國(guó)食品和藥物管理局(US Food and Drug Administration)列為致癌性測(cè)試的優(yōu)先化學(xué)物質(zhì)之一，也被我國(guó)列入《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其化合物清單》中，禁止用于所有食品動(dòng)物。孔雀石綠在水生生物體中的主要代謝產(chǎn)物為隱性孔雀石綠(1eucomalachite green，LMG)，其殘留毒性比孔雀石綠更強(qiáng)，對(duì)人們的健康構(gòu)成了潛在的巨大威脅。

由于孔雀石綠本身或其降解產(chǎn)物的生物毒性較大，盡管許多科學(xué)工作者已致力于解決由孔雀石綠造成的環(huán)境污染問(wèn)題，例如應(yīng)用吸附、化學(xué)沉淀、光降解、滲透和膜過(guò)濾等理化處理技術(shù)處理污染水源；然而，由于這些處理方法不僅處理費(fèi)用高、效率低，而且在治污的同時(shí)容易產(chǎn)生二次污染和難以處置的底泥，因此，極大地限制了其廣泛推廣使用。生物處理技術(shù)作為一種環(huán)境友好型且高效低耗的處理手段而受到越來(lái)越廣泛的關(guān)注。其中，細(xì)菌由于生長(zhǎng)速度快，容易獲得大量生物量，且易產(chǎn)生大量降解相關(guān)酶，對(duì)染料的降解效率也較高等優(yōu)勢(shì)而受到環(huán)境工作者的青睞。

以往的研究顯示，很多微生物被從環(huán)境中分離出來(lái)，測(cè)試其對(duì)孔雀石綠的降解行為，這些微生物包括Chlorella sp.、Shewanella sp.和Pseudomonas sp.等。已分離的菌株對(duì)孔雀石綠的降解行為各異，但總體而言，降解效率仍差強(qiáng)人意，因此，仍有必要廣泛篩選孔雀石綠高效降解菌株，并研究其降解行為等。同時(shí)，環(huán)境溫度等因素對(duì)細(xì)菌降解孔雀石綠的降解效果影響較大。然而，環(huán)境溫度往往隨季節(jié)變化顯著，以浙江省為例，全省全年最低氣溫可達(dá)零下3度以下，最高可達(dá)40度以上，加之實(shí)際含染料廢水或過(guò)酸或過(guò)堿，這些因素極大地限制了實(shí)驗(yàn)室篩選出的高效降解菌株在實(shí)踐中的應(yīng)用。要解決這一問(wèn)題，就必須加強(qiáng)篩選環(huán)境適應(yīng)性更強(qiáng)或能更好的適應(yīng)本地環(huán)境的高效降解菌株的研究。

發(fā)明內(nèi)容

為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的之一在于提供一種腸桿菌屬菌株CV-v，該菌株能高效降解污水中的孔雀石綠。

本發(fā)明的目的之二在于提供一種腸桿菌屬菌株CV-v降解孔雀石綠的方法，能最大化的發(fā)揮出菌株CV-v降解孔雀石綠的作用。

本發(fā)明目的之一通過(guò)提供一種腸桿菌屬(Enterobater sp.)菌株CV-v來(lái)實(shí)現(xiàn)，其在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心的保藏編號(hào)為CCTCC NO:M 2015177。

本發(fā)明目的之二是這樣實(shí)現(xiàn)的一種腸桿菌屬菌株CV-v降解孔雀石綠的方法，其關(guān)鍵在于由以下步驟組成：a、培養(yǎng)菌株：將菌株CV-v接種于LB培養(yǎng)基中，在30℃條件下，于轉(zhuǎn)速為180rpm的搖床中培養(yǎng)12-18h，以獲得大量菌體；b、將經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后的菌體培養(yǎng)物，將干重為0.1-0.2g/L的菌體接種于孔雀石綠染料濃度為1000mg/L或以下的污染水體中，并震蕩培養(yǎng)6h以上，脫色pH范圍為3.0-10.0，溫度范圍為10-50℃。

優(yōu)選地，上述步驟b中孔雀石綠染料濃度為600mg/L以下，震蕩培養(yǎng)時(shí)間為6h。

優(yōu)選地，上述步驟b中孔雀石綠染料濃度為500mg/L以下。

優(yōu)選地，上述步驟b中溫度范圍為20～50℃。

優(yōu)選地，上述步驟b中震蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為180rpm。

優(yōu)選地，上述步驟a中LB培養(yǎng)基由蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉10g/L配制而成。

一、腸桿菌屬(Enterobater sp.)菌株CV-v

一種腸桿菌屬(Enterobater sp.)菌株CV-v，于2015年3月29日在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心進(jìn)行保藏，保藏編號(hào)為CCTCC NO:M 2015177。