[發明專利]一條D螺旋區突變的瘦素活性肽及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201510228121.6
• 申請日: 2015-05-06
• 公開（公告）號: CN104829708B
• 公開（公告）日: 2017-11-28
• 發明（設計）人: 原麗紅;李林妙
• 申請（專利權）人: 廣東省生物資源應用研究所
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C12N15/16;A61K38/22;A61P3/10;A61P3/04
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司44001
• 代理人: 劉明星

技術領域：

本發明屬于生物化學與分子生物學領域，具體涉及一條D螺旋區突變的瘦素活性肽及其編碼基因和應用。

背景技術：

肥胖是人類健康最大的敵人之一，既是一個獨立的疾病，又是Ⅱ型糖尿病、心血管病、高血壓、腦中風和多種癌癥的致病誘因，被世界衛生組織列為導致疾病負擔的十大威脅之一，是不容忽視的全球性的問題。據報道，全世界每年約有1800萬人死于由糖尿病和高血壓引發的心腦血管疾病，而肥胖是糖尿病和高血壓的關鍵致病因素。肥胖癥嚴重危害了人類的健康，給社會造成巨大的損失。據報道2003年，我國因為肥胖、糖尿病等慢性疾病的支出就達到1.2萬億元，占GDP的10.3％。增長速度已經高于國民生產總值的增長速度。目前國內減肥市場需求十分廣闊，2010年減肥品消費額達600億元，而與肥胖癥有直接或間接關系的疾病如糖尿病、心血管疾病等所造成的損失更是無法估計。目前用于肥胖癥和糖尿病治療的藥物-非諾貝特和羅格列酮，雖然能夠起到降低血脂和血糖的作用，但是長期服用會對人體造成嚴重的副作用，如胰島素耐受和三致作用等，因此臨床上肥胖癥和糖尿病的治療急需安全、高效、廉價的新型藥物。

瘦素(Leptin)是由脂肪組織分泌的激素類物質，通過六種Leptin受體參與機體的脂肪代謝和食欲調節。本世際初期，瘦素被發現并且在肥胖老鼠模型上試驗獲得成功，引起科學界的轟動，預示著生物技術為全球數億的肥胖患者找到了減肥新藥。1999年科學家研究發現，人源瘦素蛋白的第116－130個氨基酸組織的多肽片段具有明顯的脂肪降解活性。隨后，美國科學家率先進行第一次瘦素蛋白人體實驗，然而在73個受試的肥胖患者中，大部分患者的減肥效果不明顯，只有2名患者在24周內減去35磅，這說明用野生型人源瘦素蛋白很難得到理想的減肥效果。

發明內容：

本發明的第一個目的是提供一種具有非常好的脂肪細胞降解活性的D螺旋區突變的瘦素活性肽。

本發明的D螺旋區突變的瘦素活性肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本發明的第二個目的是提供一種上述D螺旋區突變的瘦素活性肽的編碼基因。

本發明的第三個目的是提供上述D螺旋區突變的瘦素活性肽在制備降解脂肪細胞藥物、減肥藥物或降血糖藥物中的應用。

本發明對人源Leptin的氨基酸序列進行修飾，以提高其脂肪降解的效率。利用化學方法分別合成D螺旋區突變的瘦素活性肽，盡可能的降低蛋白質空間結構對其活性的影響，從而提高對脂肪細胞的靶向性和降解作用，實際結果表明，本發明的D螺旋區突變的瘦素活性肽的脂肪細胞降解活性明顯優于陽性對照-人源瘦素蛋白(H-LEP)和市售藥物羅格列酮(Rosiglitazone,Ros)，其降脂活性具有明顯的濃度依賴性和細胞分化時期的依賴性，在脂肪細胞分化前期(Preadipocytes)、分化期(D0-D2)和成熟脂肪細胞期(D9)三個時期均具有明顯的細胞裂解作用，并且效果顯著優于兩個陽性對照(H-LEP和羅格列酮)，從而為研制新型、高效、廉價的減肥和降血糖藥物提供候選靶標。

附圖說明：

圖1是D螺旋區突變的瘦素活性肽的設計.A:以人源Leptin序列為模板模擬構建蛋白質三維結構圖；B:人源Leptin 3號外顯子(上)與D螺旋區突變的瘦素活性肽(下)的氨基酸序列比對及功能分區.*：突變位點；