[發明專利]具有凝聚石油功能的細菌WY?4B和其用途及細菌載體

有效

• 申請號: 201510220666.2
• 申請日: 2015-04-30
• 公開（公告）號: CN104830722B
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 劉秋;于基成;潘俊華;齊小輝;宋艷超
• 申請（專利權）人: 大連民族學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/16;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/32;C02F103/08
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙)21235
• 代理人: 胡景波

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及具有凝聚石油功能的細菌WY-4B(Cobetia amphilecti，CGMCC No.10355)以及利用該菌株海洋環境治理領域的應用，尤其是涉及石油污染后引起的石油污染的生物治理領域的應用。

背景技術

近年來，由于海上原油運輸、近海采油平臺及油港數量的急劇增加，以及各種石油泄漏的事故也頻頻發生，海洋石油污染日益加劇。由于海洋石油污染將造成生物多樣性急劇下降，尤其是石油中所含的多種芳烴類有毒化合物，因其在環境中穩定、持久且具有生物累積和放大效應，以及某些化合物更是具有較強的致癌性、致突變性和致畸性。所以，其對生態環境特別是生物多樣性的破壞將是致命的。同時，石油污染將降低海濱環境的使用價值、破壞海岸設施、影響局部地區的水文氣象條件以及降低海洋的自凈能力。同時，這些被污染環境的恢復以及生物種群的再恢復則需要漫長而艱難的過程。

由于海洋不同于陸地環境，尤其是漂浮于海面的石油，迅速呈薄層蔓延于海面，蔓延速度極快，可使污染海域面積迅速增加。但對于漂浮于海面的石油污染的治理較為困難。如2010年大連新港石油管道爆炸的716事件中，前期采用物理方法收集泄露石油，僅僅減輕石油污染，而加入化學消油劑促使石油沉降等措施，則造成二次石油污染。因此，實施物理化學方法進行生態環境的重建幾乎不可能實現，生物修復海洋污染成為唯一可行的途徑。但相對于陸地，海洋植物相對匱乏，污染海洋的生態環境修復還主要依賴海洋微生物的降解作用，尤其依賴于已經適應海洋環境的各種海洋土著石油降解微生物。石油降解微生物能夠利用石油作為其食源，能夠從根本上解決石油污染的問題。但目前關于海洋石油降解微生物的報道極少，尤其是具有將石油凝聚并進行降解功能的石油降解微生物的報道更少。

同時，當石油泄露至水面時，由于石油中很多成分密度低于水密度，因此，多數石油漂浮于海面，并隨著海浪涌動及潮汐變化，不斷擴散蔓延。因此，一旦發生石油泄漏，石油會迅速蔓延，造成大面積污染。由于海洋環境不同于陸地環境，尤其是海面環境，受氣候影響較大，環境變化復雜。發生石油泄漏時(尤其是油港碼頭經常發生)，石油蔓延速度極快，攔截困難，即使能夠攔截，也無法進行后續處理。到目前為止，還沒有對海面石油進行有效攔截、回收及其降解技術的報道，更沒有載有凝聚和降解石油的微生物載體的報道。

發明內容

為解決上述海面石油污染處理的技術難題，本發明的第一個目的是提供一株同時具有凝聚和降解石油功能的細菌,發明人設法獲得高效的海洋土著石油微生物并進行研究，最終得到了海科貝特氏菌菌株WY-4B(Cobetia amphilecti，CGMCC No.10355)。發明人在要求保護此菌株的同時要求對其用途進行保護。本發明的第三個目的是提供一種具有漂浮功能，同時為上述具有凝聚和降解石油功能的細菌提供寄居場所的廢棄菌棒載體。

本發明的技術方案如下：

具有凝聚石油功能的細菌WY-4B(Cobetia amphilecti，CGMCC No.10355)，其16S rRNA序列如SEQ ID No.1所示。

所述的具有凝聚石油功能的細菌WY-4B是發明人從自然界中分離得到的。菌株WY-4B從大連新港石油污染海域采集的海底沉積物中分離獲得，采集者姓名劉長建、采集者聯系方式0411-87656046。

所述的具有凝聚石油功能的細菌WY-4B已提交保藏，具體保藏信息如下：

保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)；

保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；

保藏日期：2015年01月13日；

保藏編號：CGMCC No.10355；

所述的具有凝聚石油功能的細菌WY-4B的形態及生理生化特征為：菌落形態為：在LB培養基上培養7天后，呈乳黃色，表面略有光澤，光滑，菌落邊緣光滑。革蘭氏陰性好氧細菌，氧化酶陰性，過氧化氫酶陽性，無色素產生，菌體桿狀，極生或側生2-3根鞭毛，能運動。在NaCl濃度0-20％范圍內均能生長，最適NaCl濃度3％，生長的溫度范圍4-30℃，最是溫度范圍15-20℃，pH范圍4.5-10.5，最適pH6.5-8.5，不水解明膠，不能利用淀粉、幾丁質、七葉苷、黃嘌呤、次黃嘌呤、吐溫80。不產生H₂S，硝酸還原酶陰性，產生吲哚，能利用葡萄糖發酵。

所述的具有凝聚石油功能的細菌WY-4B用途為以凝聚和/或降解石油的方式進行石油污染的治理。