[發(fā)明專利]具有石油降解功能的低溫細菌BW02和其用途以及海底沉降石油降解菌劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510218062.4
• 申請日: 2015-04-30
• 公開（公告）號: CN104774797B
• 公開（公告）日: 2018-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉秋;于基成;潘俊華;閆建芳
• 申請（專利權(quán)）人: 大連民族學(xué)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/14;C12N11/02;A62D3/02;C02F3/34;C12R1/01;A62D101/20;C02F101/32
• 代理公司: 大連智高專利事務(wù)所(特殊普通合伙)21235
• 代理人: 胡景波

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及具有石油降解功能的低溫細菌BW02(Rhodococcusqingshengii，CGMCC No.10354)以及利用該菌株海洋環(huán)境治理領(lǐng)域的應(yīng)用，尤其是涉及石油污染后引起的石油污染的生物治理領(lǐng)域的應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來隨著海洋石油的運輸、開采、裝卸、加工和使用，海洋石油泄漏事件時有發(fā)生，海洋石油污染日益加劇。石油對生物多樣性的破壞嚴重，包括人們常見的各種魚類、鳥類以及其它生物都受到了嚴重影響，石油可沾附在魚鰓上，使魚窒息，抑制水鳥產(chǎn)卵和孵化，破壞其羽毛的不透水性，降低水產(chǎn)品質(zhì)量；同時，泄露的石油可形成油膜，阻礙水體的復(fù)氧作用，影響海洋浮游生物生長，破壞海洋生態(tài)平衡；此外還可破壞海濱風(fēng)景，影響海濱美學(xué)價值。

目前，針對于石油污染，尤其是大面積石油泄漏，通常采用的應(yīng)急措施除了采油人工打撈等物理方法，還采用加入消油劑使石油乳化，迅速沉降的方法以恢復(fù)海面暫時的清潔，雖然這一方法短時看似起到了治理的效果，但背后卻隱藏著危機，其會造成二次化學(xué)污染。

因此，實施物理化學(xué)方法進行生態(tài)環(huán)境的重建幾乎不可能實現(xiàn)，生物修復(fù)海洋污染成為唯一可行的途徑。但相對于陸地，海洋植物相對匱乏，污染海洋的生物修復(fù)還主要依賴海洋微生物的降解作用，尤其依賴于已經(jīng)適應(yīng)海底環(huán)境的各種土著石油降解微生物。這些石油降解微生物在海底能夠利用石油作為其唯一碳源，克服海底黑暗、低溫、寡養(yǎng)、缺氧的極端條件，以石油為食，將石油進行分解轉(zhuǎn)化，從而改變而海底荒漠化問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決石油泄露引發(fā)的污染問題，如海面的漂浮石油的污染問題；又如化學(xué)治理引發(fā)的二次污染，尤其是為了解決石油污染后引起的海底沉降石油污染及繼而引發(fā)的海底荒漠化問題，發(fā)明人設(shè)法獲得高效的海洋土著石油微生物并進行研究，最終得到了一株具有石油降解功能的低溫細菌BW02。發(fā)明人在要求保護此菌株的同時要求對其用途進行保護。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

具有石油降解功能的低溫細菌BW02(Rhodococcus qingshengii)。其16S rRNA序列如SEQ ID No.1所示。

所述的具有石油降解功能的低溫細菌BW02是發(fā)明人從自然界中分離得到的一株慶笙紅球菌。菌株BW02從大連新港石油污染海域采集的海底沉積物中分離獲得，采集者姓名劉長建、采集者聯(lián)系方式0411-87656046。

所述的具有石油降解功能的低溫細菌BW02已提交保藏，具體保藏信息如下：

保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)；

保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所；

保藏日期：2015年01月13日；

保藏編號：CGMCC No.10354；

所述的具有石油降解功能的低溫細菌BW02的形態(tài)及生理生化特征為：

(1)菌落形態(tài)特征

菌株BW02的菌落形態(tài)為：在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)7天后，菌落圓形凸起，黃粉色，表面光滑濕潤，邊緣整齊。

(2)菌株形態(tài)及其生理生化特性

革蘭氏陽性，好氧細菌，菌體桿狀，0.8-1.2*0.2-0.3μm，氧化酶陰性，硝酸還原酶陽性，產(chǎn)生吲哚。在NaCl濃度0-20％范圍內(nèi)均能生長，最適NaCl濃度3％，生長的溫度范圍4-30℃，最適溫度范圍15-20℃，pH范圍4.5-10.5，最適pH7.0-8.0，不水解明膠，不能利用淀粉、葡萄糖、乳糖、半乳糖、麥芽糖。能利用蔗糖、核糖、果糖和甘露糖。

所述的具有石油降解功能的低溫細菌BW02的用途為以石油降解的方式進行石油污染的治理。

優(yōu)選的，該用途是以可沉降菌劑顆粒的形式實現(xiàn)的。

發(fā)明人的第一個技術(shù)構(gòu)思為：研發(fā)一種石油降解微生物的載體，不僅能夠為菌株BW02提供寄居的空間，同時該載體可為菌株BW02提供緩釋營養(yǎng)并且具備沉降特性。

本發(fā)明的此目的通過下述方案實現(xiàn)：

海底沉降石油降解菌劑，是將具有石油降解功能的低溫細菌BW02的發(fā)酵料與石油降解微生物載體的制備原料按照1:5-15的質(zhì)量比，優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合后造粒烘干而得；進一步的，使最終的菌劑濃度為10¹⁰cfu/ml以上為佳；

所述的石油降解微生物載體的制備原料及其配比包括：