[發明專利]一種新型人3號染色體探針的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201510211541.3
• 申請日: 2015-04-29
• 公開（公告）號: CN104830844A
• 公開（公告）日: 2015-08-12
• 發明（設計）人: 陳華云;劉淑園;陳嘉昌;丁渭;肖湘文;黃爽;曾燁;趙麗;方鳳銀
• 申請（專利權）人: 廣州和實生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種新型人3號染色體探針的制備方法及其應用。

背景技術

熒光原位雜交（FISH,?fluorescence?in?situ?hybridization）是一項在體外直接觀察細胞中特定核酸的技術。根據堿基互補配對的原則，特定的DNA序列與細胞內的目標序列互補結合。由于探針帶有熒光，在合適的激發光照射下，雜交探針及目標DNA能夠在熒光顯微鏡下被清楚地觀察到，是一種直觀有效的檢測方法。

由于傳統FISH探針序列的長度較大，導致所需要的雜交時間很長（一般是過夜雜16-18小時），不能及時的得到檢測結果，這不利于臨床的診斷及治療。對FISH探針進行改進，縮短雜交時間，提高檢測效率，有利于臨床的診斷及治療。

?????有必要研究出一種新型快速FISH探針的制備方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新型人3號染色體探針的制備方法及其應用。

本發明所采取的技術方案是：

新型人3號染色體探針，包括FISH熒光探針，緩沖液和染色液，其中，3號染色體特異性探針的序列為：

探針1：TGAGTTTGGAAACAGTCAGTTTGTA

探針2：CACTTTGAGGCCATTGGTGGAAAAG

探針3：CTTGTCTGTGGAATTTGCAAGGGGA

探針4：CAACTCACAGAGTTTAACCTTTCTT

探針5：CTCAGGAACTACTTTGTGATATGTG

探針6：ATATTTGGACCTCTTTGAGGCTTTC

探針7：ACAGAATCATTCTCAGGAACTACTT

探針8：CTTCCTTTAGACAGTGCAGATTTGA

探針9：CATAATGCTAGACAGAAGAATTCTC

探針10：CTTCTTTTGGGATGTATGTATTCA

探針11：AGTTGAACCTTCCTTTAGACAGAGC

探針12：CACTCTTTTTGTGGAATTTGCAAG

探針13：ATTCTAGCAGTATGAGGCCAATGGT

探針14：CATTCTCAGAAACTGCTTTGTGATG

探針15：CTCTTTGAGGCCTTCGTTGGAAACG

探針16：CATAGAGCAGTTTGGAAAGACTTAG

探針17：CTCAGTAGCTTCTTTGTGTGTGTG

上述檢測試劑盒中的使用的探針中，3號染色體特異性探針連接的熒光基團為綠色熒光基團。

優選的，上述探針是在染色體上重復性高，特異性好的短序列。

????優選的，上述探針所用緩沖液為：20mM～50mM?Tris-HCl（PH8.0～8.8），10mM?MgCl₂，10%～30%甲酰胺。

????優選的，上述探針的雜交溫度為42℃，雜交時間為20分鐘。

本發明的有益效果是：

本發明試劑盒，采用優化的短序列熒光探針，將原有的FISH檢測時間由16～18小時縮短至1～2小時，可以快速、準確地檢測出人3號染色體，對未來染色體異?？焖贆z測方法的探究起指示性作用。

附圖說明

圖1是人3號染色體經本試劑盒熒光探針染色后的鏡檢結果。

具體實施方式

實施例1：

一、新型人3號染色體探針，包括FISH熒光探針，緩沖液和染色液，其中，3號染色體特異性探針的序列為：

探針1：TGAGTTTGGAAACAGTCAGTTTGTA

探針2：CACTTTGAGGCCATTGGTGGAAAAG

探針3：CTTGTCTGTGGAATTTGCAAGGGGA

探針4：CAACTCACAGAGTTTAACCTTTCTT

探針5：CTCAGGAACTACTTTGTGATATGTG

探針6：ATATTTGGACCTCTTTGAGGCTTTC

探針7：ACAGAATCATTCTCAGGAACTACTT

探針8：CTTCCTTTAGACAGTGCAGATTTGA

探針9：CATAATGCTAGACAGAAGAATTCTC

探針10：CTTCTTTTGGGATGTATGTATTCA

探針11：AGTTGAACCTTCCTTTAGACAGAGC