[發(fā)明專(zhuān)利]一種microRNA-30a-5p的檢測(cè)試劑盒和檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510147962.4
• 申請(qǐng)日: 2015-03-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104877992A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅鳳鳴
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 四川大學(xué)華西醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種細(xì)菌的檢測(cè)技術(shù)，特別是microRNA-30a-5p的檢測(cè)試劑盒和檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

腫瘤的診斷主要依靠病理學(xué)、影像學(xué)及血清學(xué)證據(jù)，而目前常用的腫瘤標(biāo)志物在敏感度、特異性、費(fèi)用方面存在一些不足，而近年來(lái)學(xué)者們對(duì)miRNA的深入研究為腫瘤診斷提供了新的切入點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，microRNA-30a-5p的表達(dá)水平與腫瘤相關(guān)，可用于腫瘤的診斷。

然而，目前通過(guò)PCR檢測(cè)microRNA-30a-5p的表達(dá)水平的方法存在擴(kuò)增效率低、出現(xiàn)非特異性產(chǎn)物幾率較高等問(wèn)題，大大影響結(jié)果的真實(shí)性和可靠性。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種新的microRNA-30a-5p的檢測(cè)試劑盒和檢測(cè)方法。

本發(fā)明提供了SEQ?ID?NO：1～3所示的引物對(duì)。

本發(fā)明還提供了SEQ?ID?NO：1～2所示的引物在制備檢測(cè)microRNA-30a-5p的試劑中的用途。

所述試劑還包括SEQ?ID?NO：3所示引物。

本發(fā)明還提供了一種檢測(cè)microRNA-30a-5p的試劑盒，包含序列如SEQ?ID?NO：1～2所示的引物。

所述試劑盒還包括SEQ?ID?NO：3所示引物。

本發(fā)明還提供了一種檢檢測(cè)血漿中microRNA-30a-5p含量的方法，包括如下步驟：

a，提取樣本RNA：提取待檢樣本中的RNA；

b，基因擴(kuò)增：用前述的試劑盒對(duì)待檢樣本中的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增；

c，結(jié)果檢測(cè)：對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)。

綜上，本發(fā)明檢測(cè)試劑盒和檢測(cè)方法可以有效檢測(cè)microRNA-30a-5p，特異性強(qiáng)、擴(kuò)增效率高、靈敏度高、穩(wěn)定性好，檢測(cè)快速，可用于腫瘤檢查，具有良好的應(yīng)用前景。

以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明權(quán)利要求書(shū)記載的內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

附圖說(shuō)明

圖1肺癌組織2中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖2肺癌組織2中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖3正常肺組織2中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖4正常肺組織2中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖5肺癌組織3中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖6肺癌組織3中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖7正常肺組織3中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖8正常肺組織3中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖9肺癌組織4中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖10肺癌組織4中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖11正常肺組織4中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖12正常肺組織4中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖13肺癌組織5中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖14肺癌組織5中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖15正常肺組織5中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖16正常肺組織5中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖17肺癌患者血漿1中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖18肺癌患者血漿1中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖19正常人血漿1中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖20正常人血漿1中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖21肺癌患者血漿2中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖22肺癌患者血漿2中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖23正常人血漿2中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖24正常人血漿2中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線

圖25肺癌患者血漿3中microRNA-30a-5p含量的擴(kuò)增曲線

圖26肺癌患者血漿3中microRNA-30a-5p含量的熔解曲線