[發明專利]一種青蛤酶解多肽的制備方法和應用

在審

• 申請號: 201510099953.2
• 申請日: 2015-03-06
• 公開（公告）號: CN104789626A
• 公開（公告）日: 2015-07-22
• 發明（設計）人: 楊最素;丁國芳;潘欣;趙莎莎;趙玉勤;閆海強
• 申請（專利權）人: 浙江海洋學院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛

1.一種青蛤酶解多肽的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)取新鮮的青蛤，去殼取內臟，用勻漿機破碎，得青蛤內臟勻漿液；

(2)在上述勻漿液中按1:3～4的比例加入蒸餾水，用一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶液調節勻漿液的pH值至9～11，加入1000～2000u/g堿性蛋白酶，40～50℃酶解4～8h，沸水滅活10～15min；

(3)將滅活后的酶解液冷卻至室溫，9000～10000r/min離心10～15min，取上清液旋轉蒸發濃縮，冷凍干燥得青蛤酶解多肽。

2.如權利要求1所述的青蛤酶解多肽的制備方法，其特征在于，其特征在于，所述步驟(2)中酶解溫度為50℃，酶解時間為4h，堿性蛋白酶添加量為2000u/g，酶解pH為9。

3.如權利要求1或2所述的青蛤酶解多肽的制備方法，其特征在于，所述青蛤酶解多肽的分子量為15～25KDa。

4.一種如權利要求1所述的青蛤酶解多肽在抗氧化活性產品中的應用。

5.如權利要求4所述的青蛤酶解多肽在抗氧化活性產品中的應用，其特征在于，所述抗氧化活性為對自由基的清除作用、對Fe²⁺離子的螯合作用、還原能力以及對pBR322DNA損傷的保護作用。

6.如權利要求5所述的青蛤酶解多肽在抗氧化活性產品中的應用，其特征在于，所述的自由基為羥基自由基和DPPH自由基，所述pBR322DNA損傷由羥基自由基誘導。

7.如權利要求6所述的青蛤酶解多肽在抗氧化活性產品中的應用，其特征在于，所述青蛤酶解多肽濃度為1.57mg/mL時，對DPPH自由基的清除率達到50％，所述青蛤酶解多肽濃度為5mg/mL時，對DPPH自由基的清除率達到91.24％；

所述青蛤酶解多肽濃度為2.1mg/mL時，對DPPH自由基的清除率達到50％，所述青蛤酶解多肽濃度為5mg/mL時，對DPPH自由基的清除率達到62.83％；青蛤酶解多肽對Fe²⁺離子的螯合能力的EC50為2.75mg/mL，且當青蛤酶解多肽濃度為5mg/mL時，螯合力為61.13％；

所述青蛤酶解多肽的還原能力與其濃度呈正相關，且還原力為0.331。

8.如權利要求4～7中任一權利要求所述的青蛤酶解多肽在抗氧化活性產品中的應用，其特征在于，所述抗氧化活性產品為食品、藥品、保健品以及化妝品。