[發明專利]一種活體誘導南高叢越橘四倍體的方法

無效

• 申請號: 201510099586.6
• 申請日: 2015-03-06
• 公開（公告）號: CN104719156A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發明（設計）人: 朱遠星
• 申請（專利權）人: 朱遠星
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 吳安儀

技術領域

????本發明涉及農業生物技術中植物多倍體培育的方法，具體地說，涉及一種活體誘導南高叢越橘四倍體的方法。

背景技術

越橘屬于杜鵑花科越橘屬多年生落葉或常綠灌木，果實為藍色或紅色，果實大小因種類不同而異，果肉柔軟多汁，風味醇美，含有豐富的維生素和及其他果品中少有的特殊營養成分,具有較高的保健藥用價值。由于其獨特的風味及營養保健價值,其果實及加工品供不應求。現有的越橘栽培品種中,南高叢越橘原產美國東南部亞熱帶,分布在沿海及內陸沼澤地，耐濕熱、耐寒冷、喜濕潤、溫暖的氣候條件,適宜亞熱帶地區氣候條件,主要在我國黃河以南地區,如華東、華南地區發展,其栽培品種較少。

南高叢越橘（Vaccinium?australe）具有抗逆性強、生長速度快、產量高等優點，但因果實較小而制約了其推廣種植。多倍體作為植物進化的途徑之一,一般具有巨大性、低孕性、生長旺盛、大果、莖桿粗壯、抗逆性強等特點,且相對常規雜交育種而言,多倍體育種周期較短，能較快的得到一個植物的新品種。因此,進行越橘多倍體育種研究,可以提高果實產量,增強其生長勢,提高越橘品質,是選育優質越橘新品種的重要途徑。因此，本發明以組培苗生根苗為材料，采用活體誘導法對南高叢越橘組培苗進行四倍體誘導，獲得了抗逆性強、優質、高產、單果大的南高叢越橘植株，對培育適應熱帶及亞熱帶的大果型越橘新品種具有重要的現實意義。

發明內容

????本發明的目的在于提供出一種活體誘導南高叢越橘四倍體的方法，本發明以組培苗生根苗為材料，采用活體誘導法對南高叢越橘組培苗進行四倍體誘導，獲得了抗逆性強、優質、高產、單果大的南高叢越橘植株，從而實現了本發明的目的。

?本發明的一種活體誘導南高叢越橘四倍體的方法，包括以下的步驟：

（1）組培苗的生根：取高3～5cm高，生長健壯的南高叢越橘組培苗接種到生根培養基中進行誘導生根。接種后先在25～28℃條件下全暗培養10～20天，然后置于每天光照14～16小時，光照強度為3000～5000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養至生根。

（2）煉苗移栽：根長至1～2cm試管苗的培養瓶瓶蓋打開在室外于自然光照下煉苗2～4天后將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，盡量不傷害根部，栽入微酸性基質中并定植于大田中，移栽1個月內保持空氣濕度80%以上。

（3）多倍體誘導：將步驟（2）精心管理待其正常生長45～60天后，選擇莖尖生長旺盛的幼苗作為活體誘導材料。在幼苗生長旺盛的時段，用脫脂棉包裹其新芽,然后用不同濃度的誘變劑對其進行滴定處理12～48h。為防止其蒸發,用透明小拱棚遮蓋幼苗,正常光照,并每隔3～6h滴定一次,保持脫脂棉濕潤。處理后除去脫脂棉,揭開小拱棚,用清水沖洗幼苗5～10次,洗掉殘余藥液,在正常條件下進行田間管理。

（4）芽體生根：將步驟（3）處理的芽長到3～5cm的枝條進行形態鑒定，并取莖尖旁幼葉用去壁低滲-火焰干燥法對其進行染色體計數。同時剪取其枝條,扦插于微酸性基質中，扦插1個月內保持空氣濕度90%以上，芽體開始生根，生出新芽后，取新芽旁邊的幼葉進行染色體計數,統計變異率及多倍體比例。

????上述步驟（1）所述的生根培養基為：1/2MS+1.0～3.0mg/L?NAA+1.0～2.0mg/L?ABT₁+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

????上述步驟（1）、（4）所述的微酸性基質指的是由腐殖土:椰糠:稻谷＝3：1:1組成的、pH為5.4～5.8的基質。

????上述步驟（4）所述的誘變劑是指濃度為0.1%～0.4%的秋水仙素溶液。

與現有技術相比本發明的優點是：越橘屬于杜鵑花科越橘屬多年生落葉或常綠灌木，果實為藍色或紅色，果實大小因種類不同而異，果肉柔軟多汁，風味醇美，具有較高的保健藥用價值。南高叢越橘（Vaccinium?australe）具有抗逆性強、生長速度快、產量高等優點，但因果實較小而制約了其推廣種植。多倍體作為植物進化的途徑之一,一般具有巨大性、低孕性、生長旺盛、大果、莖桿粗壯、抗逆性強等特點,且相對常規雜交育種而言,多倍體育種周期較短，能較快的得到一個植物的新品種。本發明以組培苗生根苗為材料，采用活體誘導法對南高叢越橘組培苗進行四倍體誘導，獲得了抗逆性強、優質、高產、單果大的南高叢越橘植株，為培育適應熱帶及亞熱帶的大果型越橘新品種奠定基礎。

具體實施方式