[發明專利]一種宮頸癌尿液檢測試劑盒及其使用方法

有效

• 申請號: 201510097778.3
• 申請日: 2015-03-05
• 公開（公告）號: CN104714030A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: 朱建華
• 申請（專利權）人: 杭州欣葉生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務所 33230
• 代理人: 汪愛平;余華康

技術領域

本發明涉及體外診斷試劑領域，具體地說，涉及一種宮頸癌尿液檢測試劑盒及其使用方法。

背景技術

早期發現是治療腫瘤的關鍵，腫瘤的發展分為五個階段：良性、腫瘤細胞啟動期、腫瘤早期、腫瘤中期、晚期。癌癥的可怕之處，就在于前三個階段，影像學根本無法檢測出來，即便到了腫瘤中期，也只有非常專業的醫生用較先進的設備才能測出。世界衛生組織的研究認為：目前1/3的癌癥是可以預防的；1/3的癌癥可以通過積極治療而延長患者生命；1/3的癌癥是可以通過早期發現、早期診斷、早期治療而痊愈的。

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤。原位癌高發年齡為30～35歲，浸潤癌為45～55歲，近年來其發病有年輕化的趨勢。目前最常用于宮頸病變篩查的方法是宮頸細胞學檢查，但檢測步驟繁瑣復雜，侵入性高，且收費較高，使宮頸癌的篩查難以普及。有文獻報道了宮頸癌患者尿中存在大量非蛋白巰基，也報道了可以使用子宮頸癌快速自檢試劑盒（FST-SH）來檢測患者尿液中的非蛋白巰基，從而判斷患者是否患有宮頸癌的風險（“檢測尿中巰基篩診宮頸癌與癌前病變的臨床意義”，《臨床腫瘤學雜質》，2008年11月底13卷第11期，第974-978頁）。但該篇文獻沒有公開FSH-SH的具體組成和制備方法。

中國專利CN202092960U和CN104181155A中都公開了檢測巰基的試劑盒，但這兩篇文獻中都使用了具有嚴重健康危害的二氯化汞（即，氯化汞），對操作者的健康具有一定危險性。CN104198404A公開了一種宮頸癌篩查快速定量檢測試劑盒，其中使用DTNB作為顯色劑，但DTNB是檢測蛋白質、多肽中的巰基的，而且這種方法需要使用生化儀進行檢測，不適用病人的一般家庭操作。

發明內容

本發明的目的就是提供一種檢測靈敏度高、準確性好的一種宮頸癌尿液檢測試劑盒及其使用方法，用于檢測人體尿液中巰基從而判斷是否患有宮頸癌。

本發明的宮頸癌尿液檢測試劑盒，包括容器1和容器2，其中容器1中含有2ml?DTNB溶液，容器2中含有2ml磷鎢酸溶液。

其中DTNB溶液如下配制：首先配制Tris-甘氨酸緩沖溶液，每100ml溶液中含有1.04g?Tris（三羥甲基氨基甲烷），0.69g甘氨酸，0.12g?EDTA（乙二胺四乙酸），pH=8.0，將0.4g?DTNB（即，5,5’-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)）溶解于100ml上述緩沖液中，形成DTNB溶液。

其中磷鎢酸溶液如下配制：首先配制醋酸鹽緩沖液，2?mol/L醋酸鈉溶液98ml加2mol/L醋酸溶液2ml混合，將4g磷鎢酸溶解于100ml上述緩沖液中，形成磷鎢酸溶液。

本發明的宮頸癌尿液檢測試劑盒，其使用方法為：取受試者晨尿1ml，先滴加到含有2ml?DTNB溶液的容器中，靜置2-5分鐘，然后加入含有2ml磷鎢酸溶液的容器中，靜置2-5分鐘，觀察溶液是否有顏色變化。

判斷標準：1、若無顏色變化，判斷為陰性，提示受試者體內沒有宮頸癌；2、若顏色轉為藍色，判斷為陽性，提示受試者體內有宮頸癌。

DTNB是Ellman反應中用于測試蛋白質中游離巰基的試劑，本申請將尿液先與其進行反應，結合蛋白質中的游離巰基。如果受試者患有宮頸癌，則尿液中存在大量非蛋白質巰基，巰基為還原劑，可在酸性環境中使磷鎢酸還原成鎢藍而呈藍色，進而推斷患者患有宮頸癌。因此，本發明的試劑同樣適合患有蛋白尿的患者，提高了試劑的適用范圍。同時排除了蛋白質巰基的干擾，也提高了測試的準確性。

因此，本發明提供了一種宮頸癌尿液檢測試劑盒及其使用方法，其通過檢測患者尿液中的巰基，來判斷患者是否患有宮頸癌。該試劑組成簡單，只需兩種主要試劑。操作方便，患者在家即可操作，簡單快捷。而且通過DTNB結合蛋白質類巰基，降低了干擾，因此陽性檢出率和準確率高。

具體實施方式

下面通過實施例來描述本發明的實施方式，本領域的技術人員應當認識到，這些具體的實施例僅表明為了達到本發明的目的而選擇的實施技術方案，并不是對技術方案的限制。根據本發明的教導，結合現有技術對本發明技術方案的改進是顯然的，均屬于本發明保護的范圍。

一種宮頸癌尿液檢測試劑盒，包括容器1和容器2，其中容器1中含有2ml?DTNB溶液，容器2中含有2ml?磷鎢酸溶液。