[發(fā)明專利]一種毛竹組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510097699.2
• 申請日: 2015-03-05
• 公開（公告）號: CN104719153A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅煥榮
• 申請（專利權(quán)）人: 羅煥榮
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標(biāo)代理事務(wù)所 45109
• 代理人: 吳安儀

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)中植物組織培養(yǎng)的方法，具體地說，涉及一種毛竹組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

毛竹（Phyllostachys?Pubescens）又名楠竹，屬于禾本科剛竹屬植物，是一種大型的多年生常綠散生竹類，具有生長快、繁殖強(qiáng)、成材早、用途廣、投資少、收益大等特點(diǎn)。我國是毛竹的中心分布區(qū)之一，素有“東亞文明及竹子文明”之稱，主要分布于長江以南,南嶺以北,戴云山以西,武陵山以東。毛竹林在創(chuàng)造生態(tài)環(huán)境佳境的同時,在農(nóng)業(yè)建設(shè)中占據(jù)重要的地位,在國民經(jīng)濟(jì)中也占有一定的比例。毛竹利用及應(yīng)用遍及各行各業(yè)，主要在農(nóng)村和農(nóng)業(yè)用竹、手工業(yè)用竹、建筑業(yè)用竹、造紙業(yè)用竹、竹等加工利用等方面，而且“以竹代木”,“以竹代塑”等正為解決我國資源緊缺提供了廣闊的前景,具有深遠(yuǎn)的戰(zhàn)略意義。因此，發(fā)展竹林是發(fā)展林業(yè)的重大措施,也是山區(qū)致富的重要途徑。

毛竹是集經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)功能和觀賞價值于一身的竹種,產(chǎn)生著巨大的社會、經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價值。傳統(tǒng)的毛竹繁殖方式主要以埋鞭、埋稈、埋節(jié)等無性繁殖方式為主,但傳統(tǒng)無性繁殖方法取材比較困難、繁殖系數(shù)不高、成本難以控制在較低水平,難以滿足當(dāng)前生產(chǎn)的需要。組織培養(yǎng)育苗具有繁殖快、花費(fèi)少、增殖系數(shù)高等特點(diǎn)。竹子組織培養(yǎng)技術(shù)體系的建立，有助于竹子的快速繁殖,轉(zhuǎn)基因培育優(yōu)質(zhì)竹種等研究，并有望實現(xiàn)毛竹產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容

????本發(fā)明的目的在于提供出一種毛竹組織培養(yǎng)方法，本發(fā)明以毛竹種子為外植體，經(jīng)過種子消毒、誘導(dǎo)、增殖、生根以及煉苗移栽等步驟建立了建立了毛竹組織培養(yǎng)快繁技術(shù)體系，從而實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。

?本發(fā)明的一種毛竹組織培養(yǎng)方法，包括以下的步驟：

（1）種子萌發(fā)：采集回來的種子在通風(fēng)陰涼處干燥后置于4℃的冰箱中密封保存?zhèn)溆谩Ｈサ舴N子的外稃,選擇顆粒飽滿,色澤明亮的完整種子并去掉毛尖。淸水洗去表面附著物后,洗衣服液浸泡5～15min,然后流水沖洗1～3h。于30～40℃中浸種10～18h后，在超凈工作臺中用4%～8%次氯酸鈉溶液中消毒10～30min，后用無菌水洗3～5次，再用0.1%～0.3%升汞溶液消毒10～25min，用無菌水沖洗4～6次后用無菌濾紙吸去水分后以平放方式接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)7～14天，然后置于每天光照12～16小時，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)直至形成叢生芽。

???（2）增殖培養(yǎng)：將步驟（1）培養(yǎng)得到的小苗，從基部切取芽并轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)1～3天，然后置于每天光照12～16小時，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)，30天繼代一次。

???（3）生根培養(yǎng)：將步驟（1）或（2）的叢生芽長至3～4cm高時，切割成單芽并接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)1～3天，然后置于每天光照14～16小時，光照強(qiáng)度為3000～5000lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)至生根。

（4）煉苗移栽：將高約5～6cm的生根試管苗的培養(yǎng)瓶蓋半開煉苗3～5天，再全開瓶蓋加入適量的自來水并置于自然光照下煉苗5～7天，將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基，栽入由泥炭土:黃沙泥=2:1混合成的基質(zhì)中并定植于大田中。

????上述步驟（1）所述的萌發(fā)培養(yǎng)基為：MS+1.0～3.0mg/L?6-BA+2.0～6.0mg/LTDZ+4.0～8mg/LGA₃+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

????上述步驟（2）所述的增殖培養(yǎng)基為：MS+0.1～1.0mg/L?6-BA+1.0～3.0mg/LTDZ+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

上述步驟（3）所述的生根培養(yǎng)基為：1/2MS+1.0～5.0mg/L?GGR?+1.0～3.0g/L?GA₃+0.1～0.5mg/L?IBA+1.0～5.0mg/L?La(NO₃)₃+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。