[發明專利]一種光合菌肥的制備方法

有效

• 申請號: 201510095240.9
• 申請日: 2015-03-04
• 公開（公告）號: CN104628429B
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 蔣常德
• 申請（專利權）人: 佛山市艷暉生物科技有限公司
• 主分類號: C05F11/08
• 分類號: C05F11/08;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙)11411
• 代理人: 黃冠華

技術領域

本發明屬于一種功能性微生物菌肥技術范圍，具體的說是涉及到一種防治水稻硫化氫中毒的光合菌肥的制備方法。

背景技術

硫是甲硫氨酸、半胱氨酸等硫氨基酸的組成成分。硫在植物體內除以有機態存在外，有相當多的硫是以無機態存在，并參與氧化還原反應。硫還是葉綠素的組成成分，但缺乏時莖葉變黃，因此可以認為硫間接地參與葉綠素的生成。硫在體內的移動狀況與氮、磷類似，它被水稻吸收后，從莖向葉鞘、葉片移動，在葉片合成蛋白質后向穗部移動。硫在莖葉中含量與磷類似，為0.15%～0.30%。此外，缺硫時，由于蛋白質合成受阻，因而根部發育衰退，影響養分的吸收。 當水稻從營養生長進入生殖生長時，水稻根部的氧化力增強，使根圈呈厭氧狀態，這時硫酸還原菌迅速增殖，將硫酸根還原成負二價硫離子，水稻根際發生硫化氫以及腐胺、尸胺等的積累，對水稻根系和地上部產生毒害作用。水稻硫化氫中毒的癥狀為：根系生長發育受阻，白根少，根系短，呈黃褐色，甚至黑色，嚴重時發生根腐，局部出現水浸狀或燙傷狀，軟弱而無彈性，有時可嗅出硫化氫的氣味。由于根系生長不良，地上部也逐漸出現中毒癥狀，表現為老葉黃化衰敗，并漸向上部新葉發展，直至植株枯死。

而紫硫光合細菌包括著色菌科和外硫紅螺菌科，這類細菌中的所有菌種都能在有元素硫或硫化物的存在下，同化二氧化碳進行光合作用，并在菌體細胞內或細胞外蓄集硫粒。它們是以硫化氫作為電子供體，以二氧化碳為碳源的光能自養菌，都能在厭氧條件下進行硫化氫的氧化作用。因此紫硫光合細菌通過氧化硫化氫，從而改善根際還原條件，提高水稻產量。紫硫光合細菌還含有抗細菌，抗病毒物質。它們在光照或黑暗條件下均有鈍化病原物致病力以及抑制病原物生長的能力。與施用無機肥料相比，施入硫細菌能抑制絲狀真菌等有害菌群生長而增加土壤中有益放線菌的數量，后者又能抑制植物病原菌的生長，從而修復土壤，使土壤保持良好的狀況。紫硫光合細菌防治病蟲害不僅體現在對農作物生長的保護上，還可作為瓜果保鮮劑和動物養殖中的餌料和殺菌劑，即營養又高效安全。

但目前，大部分研究光合細菌主要是集中在紫色非硫光合細菌上，如沼澤紅假單胞菌，球形紅假單胞菌，莢膜紅假單胞菌等紅假單胞菌屬上。研究者認為這些紫色非硫細菌不能利用硫化物或者只能在硫化物的濃度保持非常低值的情況下，硫化物是能被利用，或者是紫色非硫細菌的存在而誘導其他硫氧化細菌的生長而能降低硫化氫含量（李秀珠），換句話說，其紫色非硫細菌對硫化物的直接降解的不明顯或效果不顯著。而對紫色硫細菌的對硫化物的降解效果顯著，但研究較少，四川大學的馮甦對紫硫細菌中的桃紅莢硫菌進行了研究，他認為桃紅莢硫菌適于應用到制作菌肥和處理含硫污染物方面。但要投入實際運用，首要要解決的問題是，該菌的生長速度緩慢，一般要培養兩周以后才會有明顯的生長趨勢，培養20-40天才能做為菌劑使用，且OD650的值不高于1，活菌含量低于1億cfu/ml，較長的生長周期不利于大規模的應用。而到目前為止，還未見有關桃紅莢硫菌制備方法技術方案公開。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供一種桃紅莢硫菌生長速度快，菌體含量高，培養時間短，能快速有效防治水稻硫化氫中毒的光合菌肥的制備方法。

本發明所采用的技術方案是：采用紫硫光合細菌中的桃紅莢硫菌菌種按以下步驟進行培養：

⑴、半固體種子活化培養：將桃紅莢硫菌種穿刺在半固體紫硫光合細菌培養基中，25-35℃光照培養7-10天，待穿刺的菌線變紅并長出菌苔，即可為活化的菌種；

⑵、種子培養：將活化的菌種接種至種子液體培養基中，溫度25-35℃，光照強度為：1000-3000lux，光照厭氧培養7-10天，檢測種子的OD650≥1.2，活菌數≥6億cfu/ml即為種子培養液；

（3）、發酵培養：將種子培養液與發酵培養基以1：2-1：5的接種量接種，在光照培養罐中厭氧培養7-10天，培養溫度25-35℃，光照強度為：1000-4000lux，攪拌速度為120轉/分鐘，待檢測其OD650≥4，活菌數≥20億cfu/ml即可放罐，灌裝，包裝成品。

所述的半固體紫硫光合細菌培養基為：氯化銨0.4-1.2g/L，磷酸二氫鉀0.5-1g/L，二水氯化鈣0.05-0.2g/L，氯化鎂0.1-0.5g/L，碳酸鈉1-5g/L，醋酸鈉1-2 g/L,蘋果酸鈉0.5-1.5g/L，九水硫化鈉0.1-1g/L，瓊脂8-10g/L，微量元素1mL,用醋酸調PH至7.0-7.2,其中九水硫化鈉先配制成0.1g/mL單獨滅菌。