[發明專利]磷酸檸檬酸二芐酯在抑制鈣離子沉積疾病中的應用

有效

• 申請號: 201510095235.8
• 申請日: 2015-03-04
• 公開（公告）號: CN104784191B
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發明（設計）人: 陸豫;鄭楠;余勃;潘棟梁;胡川
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: A61K31/661
• 分類號: A61K31/661;A61P19/02;A61P29/00;A61P19/08;A61P9/10;A61P9/00;A61P35/00;A61P13/12;A61P13/04;A61P19/06
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司36115
• 代理人: 施秀瑾

技術領域

本發明屬于化學生物學技術領域。

技術背景

在人體內含鈣晶體如：尿酸單鈉，焦磷酸鈣CPPD，堿性磷酸鈣BCP晶體，草酸鈣聚合物等普遍存在。研究表明人體細胞內鈣晶體水平能調控基因表達影響許多生命過程，從細胞生長到凋亡都有影響。而含鈣晶體在骨關節軟骨和關節組織的沉積會導致關節疾病。例如，尿酸單鈉與痛風有關，焦磷酸鈣CPPD與假痛風，堿性磷酸鈣BCP晶體與軟骨退化和急性鈣化性關節周炎，結石有關，c-fos和c-jun原癌基因表達有關。

天然產物結構和生物活性的多樣性，使它在藥物研究史上一直占據著非常重要的地位。以活性天然產物為先導化合物，對其結構修飾改造以獲得高效、低毒的藥物，是當前新藥開發的重要途徑之一。其中檸檬酸磷酸酯對于含鈣結晶在骨關節和骨組織沉淀有抑制作用，可用于防止骨關節炎，風濕性關節炎和一些相關的疾病如：動脈粥樣硬化，心臟瓣膜鈣化，軟組織腫瘤，軟骨鈣質沉著癥，腎結石，尿路結石等。但由于檸檬酸磷酸酯存在脂溶性差，且穩定性較低等缺陷，因此以檸檬酸磷酸酯為先導,尋找與發現新的具有更高生理活性衍生物是近年來藥物研究與開發的熱點之一。

發明內容

本發明的目的是提出磷酸檸檬酸二芐酯在抑制鈣離子沉積疾病中的應用。

本發明所述的磷酸檸檬酸二芐酯結構如下式所示：

本發明的磷酸檸檬酸二芐酯，由檸檬酸經過化學合成而得到的。

本發明所述的磷酸檸檬酸二芐酯在抑制鈣離子沉積疾病中的應用。

本發明所述的磷酸檸檬酸二芐酯可按中國專利ZL200910186332.2檸檬酸磷酸酯的制備方法中中間體磷酸檸檬酸二芐酯的制備方法制備。

本發明選用小鼠成肌細胞C₂C₁₂和人骨骼肌細胞HSK做細胞模型，試驗數據表明磷酸檸檬酸二芐酯具有很好的抑制小鼠成肌細胞C₂C₁₂的鈣化的作用和能有效的減少人骨骼肌細胞HSK內的鈣離子濃度。選用患有關節炎的豚鼠做動物模型，采用磷酸檸檬酸二芐酯進行治療后，豚鼠骨關節骨密度照片明顯變清晰。

具體實施方式

以下通過實施例對本發明作進一步說明。

實施例1。檸檬酸三芐酯的制備。

稱取帶一個結晶水的檸檬酸28.0g，放于100ml的三頸瓶中，再稱芐醇70.0g倒入該三頸瓶中，接上分水器，回流裝置和攪拌器，于160-180℃油浴攪拌反應8h，然后在油浴185℃下減壓蒸餾出過量的芐醇，最后乘熱把該油狀物溶于無水乙醇，靜置數小時即有白色晶體析出，抽濾，用少量無水乙醇洗滌晶體，干燥即得純凈的檸檬酸三芐酯C₂₇H₂₆O₇，稱得62.7g,收率為93％。所得檸檬酸三芐酯的技術指標如下：

白色針狀晶體m.p.50-51℃.

1H NMR(CDCl3),δ:2.86(d,J＝12,2H),2.94(d,J＝12,2H),5.07(s,2H)，5.10(S,4H),7.25～7.35(m,15H)。

ESI-MS m/z(％):461([M-H]-,100)。

實施例2。磷酸檸檬酸二芐酯的制備。

將上述制得的檸檬酸三芐酯稱取30.0g，溶于25ml精制的苯中，一起加入100ml裝有溫度計，攪拌器的三頸瓶中，在冰浴下攪拌冷卻至4℃，在氮氣的保護下，把液體進樣器中溶有的13.6gPCl₅的苯溶液100ml緩慢滴加入該溶液中，溫度維持在3-5℃，滴加2h后，滴畢，再攪拌0.5h，在確保溫度不上升(維持在4℃左右)的前提下，再往其中緩慢滴加4.85ml蒸餾水，滴畢，會有白色沉淀生成，再攪拌反應1h，最后抽濾，用少量苯洗滌2-3遍，再在KOH/NaOH環境下抽干，得到白色針狀晶體即為磷酸檸檬酸二芐酯C₂₀H₂₁O₁₀P，稱重得25.2g，收率為86.3％。所得檸檬酸三芐酯的技術指標如下：

1H NMR(acetone-d6),δ:3.58(s,4H),5.26(s,4H),7.52(m,10H),10.74(s,2H)。

ESI-MS m/z(％):453([M-H]-,100)。

實施例3。磷酸檸檬酸二芐酯對小鼠成肌細胞C2C12鈣化的抑制作用。