[發明專利]一種改善水生動物產量和/或質量的光合細菌的制備方法

在審

• 申請號: 201510095218.4
• 申請日: 2015-03-04
• 公開（公告）號: CN104651281A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 胡艷暉
• 申請（專利權）人: 胡艷暉
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/10
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于一種功能性微生物制劑技術范圍，具體的說是涉及到一種改善水生動物產量和/或質量的光合細菌的制備方法。

背景技術

許多水生和海生的環境，諸如魚場，水池，池塘，湖泊，河口灣以及海洋在水柱中含有一個或者多處好氧區以及一個或多個厭氧區。在靠近水柱表面的有氧區，空氣和風引入氧氣，而好氧細菌產生磷酸鹽，二氧化碳和氨氣等。在靠近水柱底部的厭氧區，厭氧微生物傾向于產生硫化氫，氨氣和甲烷等。在厭氧區及其下沉積物中硫化氫的積聚是有毒的和不受歡迎的，因為它們給水生和海生動物群體帶來壓力。在某些情況下，比如在商業化的魚塘和蝦塘中，群體生活在水體底部或者靠近水體底部的地方，處于厭氧區之中或者接近該區，硫化氫的積聚會減少該群體的產量和/或其個體的質量。

在本領域中對于與厭氧區相關的問題已知若干解決方法。例如，可將化學氧化劑，諸如臭氧、二氧化氯、各過氧化氫、過氧化鈣或過氧化鎂，添加入水體中以緩解厭氧的狀況，盡管這些方法可能有效，但是它們可能是昂貴的，迫使使用者盡可能減少添加入水體的氧化劑的量。這種對節約的需要，若導致劑量不足，則可能是有害的。劑量不足會帶來問題，因為它會造成不充分氧化或部分氧化，產生氣味問題。當將二氧化氯添加至有機酸時，不充分氧化會導致氯乙酸的生成，氯乙酸在非常低的濃度下有可察覺的惡臭。然而這些步驟是設計有來消除氣味的，而可能對環境中的水生和海生動物（如魚或蝦）有害。

其他已知的控制硫化氫的方法包括用硫氧化細菌來處理，如專利200880020095.6公開了一種降硫化氫的硫氧化學細菌，副球菌屬中泛養副球菌，能降解水體中的硫化氫，以改善水生或海生動物的產量與質量，但沒有公開其具體的制備方法。而光合細菌中的紫色硫細菌也是一類具有較強降解硫化氫能力的硫氧化細菌，國內對紫色硫細菌的研究僅見于少數幾篇文獻，對光合細菌在水處理的研究也主要側重于氨氮和COD，而對于硫化物處理方面的研究較少，紫色非硫細菌對硫化物利用的能力很差，只有當硫化物的濃度保持在較低水平時，硫化物才能較好的抑制，而紫色硫細菌對硫化物具有較高的耐受性，能在厭氧條件下以硫化氫等無機物作電子供體還原二氧化碳，合成有機物從而起到去除硫化物的作用。

沙氏外硫紅螺菌，專性自養菌，厭氧菌，相對地耐氧，在空氣中馴化可生長，單個細胞無色，細胞懸液的顏色最初呈顯黃色到橙棕色，后來為棕紅色到粉紅色。PH最適范圍：8-8.5，最適生長溫度30-35℃；沙氏外硫紅螺菌有較大的適應范圍，10-40℃、500-6000lux和PH7-9.5，均能適應生長，在微好氧黑暗狀態下也能生存，條件不適時，該菌的生長處于抑制狀態，一旦條件允許，又能繼續生長。光合電子供體：硫化物，硫、硫代硫酸鹽，分子氫、醋酸鹽、丁酸鹽、丙酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽。能進行同化型的硫酸鹽還原作用。氮源：銨鹽、谷氨酸鹽、天門冬氨酸鹽。在有硫化氫時，能進行光合作用，其時他們產生元素硫，作為中間氧化物，并呈球狀沉積于細胞外的培養基中。其具有較強的降解硫化氫的能力。而到目前為止，還未見有關沙氏外硫紅螺菌制備方法技術方案公開。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供一種沙氏外硫紅螺菌生長速度快，菌體含量高，培養時間短，能快速降低水體硫化氫從而改善水生動物產量或質量的光合細菌制劑的制備方法。

本發明所采用的技術方案是：采用光合細菌中的外硫紅螺菌屬的沙氏外硫紅螺菌菌種按以下步驟進行培養：

、雙層平板種子活化培養：將沙氏外硫紅螺菌菌種在下層固體光合細菌培養基中劃線后，再在上面倒一層瓊脂培養基，25-35℃光照培養4-5天，待劃線的菌落變紅并長出菌苔，即可為活化的菌種；

、種子培養：將活化的菌種接種至種子液體培養基中，溫度30-35℃，光照強度為：1000-5000lux，光照厭氧培養6-10天，檢測種子的OD660≥1.5，即為種子培養液；

、發酵培養：將種子培養液與發酵培養基以1：4-1：5的接種量接種，在光照培養罐中厭氧培養5-7天，培養溫度30-35℃，光照強度為：1000-6000lux，攪拌速度為100轉/分鐘，待檢測其OD660≥3，活菌數≥20億cfu/ml即可放罐，灌裝，包裝成品。