[發明專利]四環曲霉酮類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201510094280.1
• 申請日: 2015-03-03
• 公開（公告）號: CN104630078B
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發明（設計）人: 鄧賢明;徐慶妍;湛瑩;亓雙;王躍宙;胡志鈺;鄭忠輝;宋思揚
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/18;C07D493/04;A61K31/366;A61P29/00;A61P19/02;A61P1/00;A61P25/00;C12R1/66
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙)35200
• 代理人: 馬應森

1.四環曲霉酮類化合物，其特征在于包括四個曲霉酮化合物，即四環曲霉酮A、四環曲霉酮B、四環曲霉酮C和四環曲霉酮D；

四環曲霉酮A的分子式為C₂₂H₂₆O₉，分子量為434.16，手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；

四環曲霉酮B的分子式為C₂₂H₂₈O₈，分子量為420.18，手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；

四環曲霉酮C的分子式為C₂₁H₂₄O₉，分子量為420.14，手性碳的絕對構型為5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；

四環曲霉酮D的分子式為C₂₂H₂₈O₉，分子量為436.46，手性碳的絕對構型為5aS、6S、6aR、10aR、11R、11aS、12R；

四環曲霉酮A、四環曲霉酮B、四環曲霉酮C和四環曲霉酮D的化學結構式如下：

2.如權利要求1所述四環曲霉酮類化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)制備馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基平板，將曲霉(Aspergillus sp.)ZL01b-14轉接到馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基平板上，倒置培養得平板菌種，所述曲霉(Aspergillus sp.)ZL01b-14的保藏編號為CCTCC NO：M 2014668；

2)將步驟1)得到的平板菌種接種于馬鈴薯-葡萄糖半海水液體培養基中搖床培養，得種 子液；

3)將步驟2)所得種子液轉接到發酵培養基中，倒置發酵后得發酵培養物；

4)將步驟3)得到的發酵培養物用混合有機溶劑浸提，將提取液減壓濃縮至干，甲醇溶解后過濾，濾液再減壓濃縮至干得浸膏，浸膏用乙酸乙酯和水萃取至乙酸乙酯相無色，收集乙酸乙酯相減壓濃縮至干得粗提物浸膏，再用甲醇和石油醚萃取至石油醚相無色，收集甲醇相減壓濃縮至膏狀，然后用甲醇溶解，過濾后再次減壓濃縮，得濃縮粗提物浸膏；

5)將步驟4)得到的濃縮粗提物浸膏進行反相中壓液相柱層析，以甲醇/水連續梯度洗脫得組分1和組分2，組分1經兩次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜，得四環曲霉酮A和四環曲霉酮B；組分2經一次凝膠柱層析和一次半制備型高壓液相色譜，得四環曲霉酮C和四環曲霉酮D。

3.如權利要求2所述四環曲霉酮類化合物的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂半海水培養基的配制方法為：將去皮的馬鈴薯切成小塊，加水煮沸20～40min，紗布過濾得馬鈴薯濾液，加入葡萄糖、瓊脂和半海水，加水定容至1000mL，滅菌條件為121℃下滅菌20min；所述馬鈴薯濾液中葡萄糖與馬鈴薯的質量比為1∶(10～20)，所述瓊脂與馬鈴薯的質量比為1∶(15～20)。

4.如權利要求2所述四環曲霉酮類化合物的制備方法，其特征在于在步驟2)中，所述馬鈴薯-葡萄糖半海水液體培養基的配制方法為：將去皮的馬鈴薯切成小塊，加水煮沸20～40min，紗布過濾得馬鈴薯濾液，加入葡萄糖和半海水，加水定容至1000mL，滅菌條件為121℃下滅菌20min；所述馬鈴薯濾液中葡萄糖與馬鈴薯的質量比為1∶(10～20)；所述搖床培養的條件為27～28℃，160～180rpm，培養的時間為4～6天。

5.如權利要求2所述四環曲霉酮類化合物的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述發酵培養基采用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂-20％NaCl培養基，馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂-20％NaCl培養基的配制方法為：將去皮的馬鈴薯切成小塊，加水煮沸20～40min，紗布過濾得馬鈴薯濾液，加入葡萄糖、NaCl和瓊脂，加水定容至1000mL，滅菌條件為121℃下滅菌20min，所述馬鈴薯濾液中的葡萄糖與馬鈴薯的質量比為1∶(10～20)，瓊脂與馬鈴薯的質量比為1∶(15～20)，馬鈴薯與NaCl的質量比為1∶(0.5～1.5)。