[發明專利]一種低溫雙水相冷卻提取分離山楂肉原花青素的方法

有效

• 申請號: 201510090306.5
• 申請日: 2015-02-27
• 公開（公告）號: CN104803960B
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發明（設計）人: 高云濤;李曉芬;熊華斌;劉滿紅;馬肖艷;楊洪巧;張宏教
• 申請（專利權）人: 云南民族大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C09B61/00
• 代理公司: 四川君士達律師事務所51216
• 代理人: 芶忠義

技術領域

本發明涉及化學提取技術領域，尤其涉及一種低溫雙水相冷卻提取分離山楂肉原花青素的方法。

背景技術

原花青素是自然界一類廣泛存在于植物中的天然色素，是一類由不同數量的兒茶素或表兒茶素縮合而成的多酚化合物的總稱。原花青素在體內的抗氧化和清除自由基的能力遠高于維生素E和維生素C，由于其卓越的抗氧化能力和多種藥理活性而日益受到重視，研究表明,原花青素有其強的清除人體內致病的自由基的作用，具有明顯抑制糖尿病發病、降低低密度脂蛋白氧化修飾抑制動脈粥樣硬化作用，并可降低膽固醇水平，減少血管壁上的膽固醇沉積，提高血管壁彈性，降低血壓，預防中風、偏癱的等功效，在心血管疾病控制中發揮日益重要的作用。此外，花青素可以減緩細胞死亡和細胞膜變性，延緩衰老，對多種癌變如乳腺癌、皮膚癌等都有不同程度的抑制作用。原花青素可以維護皮膚膠原合成，抑制彈性蛋白酶，從而減少皺紋產生；原花青素可抑制絡氨酸酶活性，具有防曬美白的作用。享有“皮膚維生素”的美譽。目前，原花色素已作為一類重要的保健食品，天然食品添加劑，代替苯甲酸的等合成食品防腐劑，其開發利用已成為新興的產業，鑒于此，原花青素的提取分離技術已成為目前研究的熱點。

目前報道的花青素的提取辦法很多，包括：有機溶劑萃取法、水溶液提取法、超臨界流體萃取法、微波提取法、超聲波提取法、微生物發酵提取法、加壓溶劑萃取等，并結合液相萃取、固相萃取、薄板層析、柱層析、酶法、離子交換法、大孔樹脂法、膜分離和綜合技術法等進行純化。其中大孔樹脂吸附是近年來花青素提純最常用的方法之一，而新的純化方法例如高速逆流色譜應用。但天然花青素因其熱敏性，在受熱時易于分解失去生理活性，常規熱回流提取法和有機溶劑萃取法不僅得率低，而且功能成分受到破壞。加壓溶劑萃取、亞臨界水提取技術傳統的溶劑提取方法提取時間長，生產效率較低，且熱溶劑容易造成花青素降解以及生理活性的降低。常溫微波提取法、超聲波提取法在提取過程中存在升溫、并誘發自由基產生，導致花青素分解。因此，采用低溫提取技術以解決花青素在提取過程的失活問題是目前研發的重點，超臨界CO₂萃取萃取能力強、萃取條件溫和、提取率高、產品品質好，是較為理想的花青素提取方法，但必須在25MPa以上的超高壓狀態下才能進行，限制了設備有效容積的放大，較高的設備制造和運行費用制約了該技術在花青素生產中的應用。為改善低溫提取的傳質問題，目前已發展出低溫微波提取技術、低溫超聲波提取技術等，但因為提取體系在0℃以下存在結冰的問題，國內外報道的低溫提取原花青素的方法是多采用4～8℃，并不是真正意義上的低溫。

研究表明，山楂中的原花青素經簡單提取即可得到大量具有強生物活性的低聚體原花青素，在許多方面，山楂原花青素比葡萄籽原花青素具有更強的生物活性，而且原料來源廣泛，成本低，提取過程不需破壁處理，極具開發價值，但山楂原花青素穩定性較更差，且常規條件還存在著較明顯的酶促褐變現象，酶促褐變降低了山楂原花青素的活性，也改變了山楂原花青素的風味的感觀。因此，山楂原花青素的低溫提取技術更具研發意義。

發明內容

本專利針對上述山楂原花青素提取中的問題，將低溫雙水相提取分離體系引入山楂原花青素提取，通過實驗設計了一種低溫雙水相冷卻提取山楂肉原花青素的方法，該技術使山楂原花青素提取溫度降低至-10℃以下，在均質化條件下，實現了真正意義上的高效低溫提取，有效保留了山楂原花青素的生理活性，且簡化了工藝，原料渣與提取液分離簡單效果好、通過雙水相分離體系的引入，山楂原花青素與雜質成分得到有效分離，純度更高。

本發明采用如下技術方案：

本發明的低溫雙水相冷卻提取分離山楂肉原花青素的方法具體步驟如下：

新鮮山渣經清洗后，每10克山渣，加入30-70mL檸檬酸溶液和30-70mL氯化鈉溶液，以及30-70mL異丙醇，置于冷凍機中冷卻至-18℃，取出，用勻漿機均質處理三次，每次1-3min，靜置5-15min，待分相完全后，分去異丙醇上相，收集得到的異丙醇通過旋轉蒸發器真空蒸餾蒸去異丙醇，加入1-4ml乙醇將固體物洗出，將所得到固體20-35℃真空干燥至干，即得山楂原花青素提取物。

優選每10克山渣，加入50mL檸檬酸溶液。

優選每10克山渣，加入50mL氯化鈉溶液。

優選每10克山渣，加入50mL異丙醇。

所述的檸檬酸溶液濃度為1wt％，pH＝3。

所述的氯化鈉溶液溶度為30wt％。

優選用勻漿機均質處理三次，每次2min，靜置10min。

本發明的積極效果如下：