[發明專利]一種薄荷中可抗呼吸道合胞病毒的有效成分及制備方法

在審

• 申請號: 201510088480.6
• 申請日: 2015-02-26
• 公開（公告）號: CN104803851A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 周長征;陳飛;姚梅悅;張霞;周祉延;牛鳳菊
• 申請（專利權）人: 周長征
• 主分類號: C07C69/145
• 分類號: C07C69/145;C07C67/48;A61K31/22;A61P31/12
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技術領域

本發明涉及中藥活性成分生產提取工藝以及結構鑒定領域，涉及薄荷抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制藥領域的新用途，具體涉及利用抗病毒追蹤的方式提取分離純化薄荷抗呼吸道合胞病毒的有效成分，以及該有效成分進行結構鑒定和應用。

背景技術

最近幾年以來世界各地都受到了各種病毒的入侵，比如SARS病毒，甲型H1N1等，每次病毒的爆發都會引起人類的恐慌以及死亡。所以找到合適的抗病毒藥物迫在眉睫。

呼吸道合胞病毒是導致嬰幼兒急性下呼吸道感染最重要的病原體之一，還可引起間質性肺炎及毛細支氣管炎等同時也可以引起老年人和免疫缺陷病人住院和肺炎死亡。

呼吸道合胞病毒早在50年前就備受關注，但是目前仍缺乏對其有效的預防治療措施。利巴韋林是廣譜的對呼吸道合胞病毒有一定療效的抗病毒藥物。然而，研究發現，經過呼吸道合胞病毒感染的棉鼠模型出現了利巴韋林的抵抗株，并且對患者和醫務人員有潛在毒性，所以只有出現嚴重的RSV感染患者是才使用此藥物，因此探索對呼吸道合胞病毒具有抑制作用的新物質為時代所必需。

薄荷為唇形科植物薄荷Mentha?haplocalyx?Briq.的干燥地上部分。常用于風熱感冒，風溫初起，頭痛，目赤，喉痹，口瘡，風疹，麻疹，胸脅脹悶。薄荷是中藥復方銀翹散，感冒清熱顆粒的組成藥物。銀翹散為溫病臨床最常用方劑，廣泛應用于治療溫病范圍內的多種疾病的初期。感冒清熱顆粒是治療風寒感冒的常用藥物臨床上常用于治療感冒發熱、咳嗽頭痛、咽喉腫痛及麻疹初起等癥。

薄荷對呼吸道合胞病毒具有一定的治療作用，實驗表明薄荷提取的有效成分對呼吸道合胞病毒有很好的治療作用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是明確了薄荷抗呼吸道合胞病毒的有效成分，并為該有效成分的分離提取提供了一種利用抗病毒追蹤的方式制備薄荷抗病毒有效成分的新方法。該有效成分從唇形科植物薄荷中提取分離得到可以用于呼吸道合胞病毒感染的治療。該方法可以較為簡便的對以上有效成分進行分離提取。

本發明的優點是，本發明首次分離出了薄荷中具有抗呼吸道合胞病毒的一種有效成分，并發明了一種抗病毒追蹤的方法對該有效成分進行了制備，此分離方法目的性強，簡單節省了大量的人力物力，優于傳統的系統分離。制備得到的有效成分對呼吸道合胞病毒具有較好的治療作用。

本發明薄荷抗呼吸道合胞病毒的有效成分為3-乙酰氧基-對-薄荷烷-4，8-烯或3-乙酰氧基-對-薄荷烷-1，2-烯，該有效成分的制備方法，包括如下步驟：

(1)取一定量的薄荷藥材用10倍的水加熱回流提取2次，第一次1.5小時第二次1小時。

(2)合并兩次的提取液減壓濃縮，濃縮至每毫升藥液含有1克的藥材，然后加乙醇調節乙醇的濃度為50％，靜置24小時。過濾得到沉淀和上清液。

(3)將上清液回收乙醇，將沉淀用水溶解，分別進行抗病毒實驗。實驗顯示沉淀的抗病毒效果較好。

(4)取一定的D101大孔吸附樹脂用95％的乙醇浸泡24小時，之后裝柱，用蒸餾水洗至無醇味，然后用5倍柱體積5％的鹽酸水溶液進行沖洗浸泡3個小時，之后用蒸餾水沖至PH等于7，再用5倍柱體積的5％的NaOH水溶液進行沖洗浸泡3個小時，之后用蒸餾水沖至PH等于7，備用。

(5)取(3)中的沉淀上樣于處理好的D101大孔樹脂柱，分別用水，25％乙醇，50％乙醇，75％乙醇，95％乙醇進行沖洗，每個洗脫液中每200ml接一瓶，并且沖洗到沒有顏色之后再換下一個洗脫液。

(6)將上述接到的樣品進行抗病毒實驗。實驗顯示水6號7號8號抗病毒效果很好。

(7)將上述3個樣品點于硅膠G的薄層板上，用展開劑(氯仿∶甲醇∶水＝30∶12∶4，取下層9ml，加1.2ml的冰醋酸)。置于紫外燈(254nm)下觀察，其斑點位置一樣故合并3個洗脫樣品。

(8)將洗脫樣品用制備薄層的方法進行分離，其中固定相為硅膠G，展開劑為(氯仿∶甲醇∶水＝30∶12∶4，取下層9ml，加1.2ml的冰醋酸)。

(9)將得到的板子置于紫外燈下觀察，收集斑點和非斑點，分別用甲醇超聲溶解，之后蒸干，用水溶解。

(10)將(9)得到的斑點和非斑點部位分別進行抗病毒實驗，實驗結果顯示斑點和非斑點均有很好的抗病毒效果。

(11)將(10)得到的斑點利用質譜和核磁設備進行打譜鑒定，鑒定結果為該有效成分為3-乙酰氧基-對-薄荷烷-4，8-烯或3-乙酰氧基-對-薄荷烷-1，2-烯

具體實施方式